[发明专利]一种副猪嗜血杆菌感染仔猪模型的构建方法有效
申请号: | 201510011558.4 | 申请日: | 2015-08-04 |
公开(公告)号: | CN104488823A | 公开(公告)日: | 2015-07-29 |
发明(设计)人: | 陈洪波;程蕾;赵书红;张晶;向敏;侯永清;高其双;郭玲;邱银生;黎旺明 | 申请(专利权)人: | 武汉轻工大学 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;A61K35/74 |
代理公司: | 武汉智权专利代理事务所(特殊普通合伙) 42225 | 代理人: | 彭程程;沈林华 |
地址: | 430023 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种副猪嗜血杆菌感染仔猪模型的构建方法,涉及动物模型构建领域,包括将若干CD仔猪养殖至18~25日龄,均分为感染组A和对照组B,判定CD仔猪体内不存在HPS病原、不含APP病原或APP抗体后,饲养至40~70日龄时,向感染组A中所有CD仔猪气管内接种HPS菌种;向对照组B中所有CD仔猪气管内注射培养基,得到空白组B′,观察并检测攻毒组A′、空白组B′,提取攻毒组A′、空白组B′的肺脏组织的总DNA,判定攻毒组A′的肺脏组织中存在HPS病原的同时,空白组B′的肺脏组织的中不存在HPS病原。本发明能够降低实验成本、简便建模流程,结果的准确度较高,更加符合动物福利的相关要求。 | ||
搜索关键词: | 一种 嗜血 杆菌 感染 仔猪 模型 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种副猪嗜血杆菌感染仔猪模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、将自然分娩得到的若干禁食母猪初乳CD仔猪进行隔离,饲养至18~25日龄,将未死亡的CD仔猪随机均分为两组:感染组A和对照组B;待感染组A和对照组B的所有CD仔猪生长至30~40日龄时,采集感染组A和对照组B中所有CD仔猪的鼻拭子和非抗凝外周血;判定鼻拭子中不存在副猪嗜血杆菌HPS病原、且非抗凝外周血中不含猪胸膜肺炎放线杆菌APP病原或APP血清抗体,转入步骤二;步骤二、待感染组A和对照组B的所有CD仔猪生长至40~70日龄时,向感染组A中所有CD仔猪的气管内接种剂量为107CFU~109CFU、分散于培养基中的HPS细菌,得到攻毒组A′;接种HPS细菌的同时,向对照组B中所有CD仔猪气管内注射与HPS剂量相同的培养基,得到空白组B′,转入步骤三;步骤三、接种HPS细菌1~20天后,分别提取攻毒组A′、空白组B′的肺脏组织的总DNA,当攻毒组A′的肺脏组织的总DNA中存在HPS病原、且空白组B′的肺脏组织的总DNA中不存在HPS病原时,建模成功;当攻毒组A′的肺脏组织的总DNA中不存在HPS病原,或空白组B′的肺脏组织的总DNA中存在HPS病原时,重新执行步骤一~步骤三。
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