[发明专利]基于微液滴的数字核酸扩增定量分析方法及系统有效

专利信息
申请号: 201410655309.4 申请日: 2014-11-17
公开(公告)号: CN104450891A 公开(公告)日: 2015-03-25
发明(设计)人: 杜文斌;李昂;徐鹏;盛广济 申请(专利权)人: 中国科学院微生物研究所
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12M1/38
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 赵青朵
地址: 100101 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供一种数字核酸扩增定量分析方法及系统,该方法配制待检测核酸扩增反应液,其包含待检测核酸模板、反应缓冲水溶液、脱氧核糖核苷三磷酸、引物、聚合酶和产物标记物质;将所述配制的待检测核酸扩增反应液载入两端均有开口的微管道,所述微管道位于开口容器上方,所述开口容器盛有含有表面活性剂的油性液体;将所述微管道一端开口在所述开口容器的液面表面上下往复振动,或在液面以下左右往复振动,生成多个液滴,平铺在开口容器底部;将所述开口容器中的多个液滴进行核酸扩增反应;采集所述核酸扩增反应后的产物信号,对核酸模板进行定量分析。所述数字核酸扩增分析法能实现微体系中低浓度核酸物质定量检测,操作简便,效率高、成本低。
搜索关键词: 基于 微液滴 数字 核酸 扩增 定量分析 方法 系统
【主权项】:
一种基于微液滴的数字核酸扩增定量分析方法,包括以下步骤:a)配制待检测核酸扩增反应液,所述待检测核酸扩增反应液包含待检测核酸模板、反应缓冲水溶液、脱氧核糖核苷三磷酸、引物、聚合酶和产物标记物质;b)将所述步骤a)配制的待检测核酸扩增反应液载入两端均有开口的微管道,所述微管道位于开口容器上方,所述开口容器盛有含有表面活性剂的油性液体;c)将所述步骤b)中微管道一端开口在所述开口容器的液面表面上下往复振动,或在液面以下左右往复振动,生成多个液滴,平铺在开口容器底部;d)将所述步骤c)中开口容器中的多个液滴进行核酸扩增反应;e)采集所述步骤d)核酸扩增反应后的产物信号,对核酸模板进行定量分析。
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