[发明专利]一种产青蒿二烯的重组真核菌株及利用该重组真核菌株制备青蒿二烯的方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，公开了一种产青蒿二烯的重组真核菌株及利用该重组真核菌株制备青蒿二烯的方法。本发明提供的产青蒿二烯的重组真核菌株，在真核菌株的基因组中整合表达3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因、表达FPP合酶的基因、和表达青蒿二烯合酶的基因；该整合为整合在真核菌株的基因组的多拷贝位点。本发明提供的产青蒿二烯的重组真核菌株属于整合型重组菌株，该重组菌株显著提高了青蒿二烯的产量，更有利于青蒿二烯的生产。

主权项

1.一种产青蒿二烯的重组真核菌株，其特征在于，在所述真核菌株的基因组中整合表达3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因、表达FPP合酶的基因、和表达青蒿二烯合酶的基因；上述三种基因以表达盒的形式整合到基因组中，表达盒包括基因、启动子和终止子；所述整合为整合在所述基因组的多拷贝位点；所述真核菌株为酿酒酵母CEN.PK2‑1C；所述多拷贝位点为Delta位点；所述表达3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶的基因来自于酿酒酵母BY4741基因组，为tHMGR基因；启动子为TEF1、TPI1或GPM1；终止子为TEF1、TPI1或GPM1；所述表达FPP合酶的基因来自于酿酒酵母BY4741基因组，为ERG20基因；启动子为GPM1、TPI1、FBA1或GPD1；终止子为TPI1、TEF1、GPM1、FBA1或GPD1；所述表达青蒿二烯合酶的基因为ADS基因；启动子为ENO2、PGK1、TEF2或PDC1，终止子为GPM1、ENO2、TPI1、TEF1、FBA1或GPD1。