[发明专利]绿豆尾孢菌叶斑病的抗病性快速鉴定方法

摘要

本发明公开了一种绿豆尾孢菌叶斑病的抗病性快速鉴定方法，该方法为将绿豆种子进行表面消毒，将表面消毒后的绿豆种子点播到培养盘内；光照黑暗交替下培养，并定期观察绿豆苗生长情况；采集绿豆两叶一心期的叶片，清水洗净后放吸水纸上，并与吸水纸放入盒中保持湿润，在叶片上用牙签造成小伤口并接种6mm的菌饼，在温室条件下光照，观察其发病情况，本发明的鉴定体系是在培养室中观察发病情况。已有的观察和研究表明，病原菌的活动受到温度、光照等环境因素的影响。由于培养室的环境条件较稳定，加之本发明的鉴定体系本身是一个完全封闭的系统，使得鉴定结果的重复性和可靠性得到保证。

主权项

一种绿豆尾孢菌叶斑病的抗病性快速鉴定方法，其特征在于：包括以下步骤：1)挑选颗粒饱满，大小相似的绿豆种子进行表面消毒，备用；2)将培养土装袋后进行高压灭菌，灭菌后的有机培养土分装到培养盘内，将表面消毒后的绿豆种子点播到培养盘内；光照黑暗交替下培养，并定期观察绿豆苗生长情况；3)将尾孢菌菌株在V8果蔬汁培养基平板上，并将平板置于28℃恒温培养箱中活化7天，再用无菌的、直径6mm的打孔器在活化好的菌种菌落生长边缘打孔，将菌丝面扣在新的V8果蔬汁培养基中进行扩大繁殖，以备接种；4)采集绿豆两叶一心期的叶片，清水洗净后放吸水纸上，并与吸水纸放入盒中保持湿润，在叶片上用牙签造成小伤口并接种6mm的菌饼，在温室条件下光照；5)观察其发病情况，接菌7d后，测量叶片病斑大小，根据病斑大小，进行分级，计算病情指数；其中0级：无可见侵染病斑；1级：叶片上仅有小点状病斑，直径2mm以下；2级：病斑直径3mm以下，边缘褐色；3级：直径3～6mm以上的中型斑，边缘褐色，中央有灰白色坏死组织；4级：直径6mm以上的不规则型病斑，其中0、1级属于抗病型，记以R，2级属于中间型，记以I，3、4级属感病型，记以S。