[发明专利]一种猪瘟病毒快速检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种猪瘟病毒快速检测试剂盒,属于病毒检测领域。本发明通过设计的可检测猪瘟病毒的通用引物，并将PT-PCR技术与核酸胶体金免疫层析技术相结合，建立的适用于猪瘟病毒的快速检测试剂盒。本发明设计和优化了一种检测猪瘟病毒的通用引物，并与核酸胶体金层析试纸条技术联用在短时间内即可完成不同种锦紫苏类病毒的PCR产物的检测，不需要电泳和溴化乙锭的染色，更为快速实用，简单，灵敏，且安全无污染。

主权项

一种猪瘟病毒的快速检测试剂盒，其特征在于，主要由以下几种试剂和层析试纸条组成：试剂A：病毒RNA提取液,由常规现有技术的RNA提取液构成；试剂B: 包括10×One step RNA PCR buffer，MgCl2，DNTP Mixture，RNase Inhibitor，AMV‑Optimized Taq，AMV RTase，正向引物，反向引物,所述正向引物，反向引物分别标记了地高辛、荧光素，所述正向引物（F‑primer）序列为5’‑ACGGAGGGACTAGCCGTAGTG‑3’，反向引物（R‑primer）序列为5’‑CTGTTAGTGGGCCTCTGCAGC ‑3’；试纸条：由玻璃纤维膜、NC膜、吸水纸和双面胶塑料板组成，硝酸纤维素膜（NC膜）粘贴在双面胶塑料板上，玻璃纤维膜和吸水纸分别粘贴在NC膜的两侧并且与NC膜有部分重叠；NC膜上有T点（检测点）和C点(质控点)，T点位于靠近玻璃纤维膜的一侧，玻璃纤维膜上固定有胶体金标记的兔抗地高辛抗体，T点固定的是鼠抗荧光素抗体，C点固定的是羊抗兔多克隆抗体。