[发明专利]一种双基因缺失粗糙型牛种布鲁氏菌及其疫苗的生产方法

摘要

本发明涉及一种双基因缺失粗糙型牛种布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术，缺失牛种布鲁氏菌2308株WboA基因以及vjbR基因。上述2个基因的缺失，一方面使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件(WboA基因缺失导致)，菌落形态由光滑型转变为粗糙型；另一方面由于vjbR基因的缺失，导致重组菌的毒力和在细胞内生存能力下降，降低布鲁氏菌对靶动物的感染能力，进一步提高了疫苗的安全性。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状，并有效提高现有疫苗的安全性。

主权项

基因缺失粗糙型布鲁氏菌，其特征在于采用非抗性筛选技术，缺失牛种布鲁氏菌2308菌株wboA基因1～897bp之间的序列，使原始菌株由光滑型转变为了粗糙型；同时缺失了vjbR基因，使重组菌的安全性进一步提高。用该菌(2308‑ΔWboA‑ΔvjbR)制备的疫苗免疫动物后，其血清可用常规的凝集试验与自然感染相区分，牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)2308‑ΔWboA‑ΔvjbR菌株已于2014年05月20日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物保藏委员会普通微生物保藏中心，保藏号为：CGMCC No.8884。