[发明专利]一种用于检测褶牡蛎嗜酸性和嗜碱性粒细胞吞噬力的方法在审
| 申请号： | 201410178166.2 | 申请日： | 2014-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN103994963A | 公开（公告）日： | 2014-08-20 |
| 发明（设计）人： | 林听听;周凯;张东;来琦芳;么宗利 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | G01N15/10 | 分类号： | G01N15/10;G01N1/28 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于检测褶牡蛎嗜酸性和嗜碱性粒细胞吞噬力的方法，包括：(1)褶牡蛎血细胞悬液制备；(2)荧光微球吞噬；(3)中性红染色；(4)碘化丙啶衬染；(5)镜检。本发明具有操作简单、快速、准确、特异性强、重复性高等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 牡蛎 酸性 碱性 粒细胞 吞噬 方法 | ||
【主权项】：
一种用于检测褶牡蛎嗜酸性和嗜碱性粒细胞吞噬力的方法，包括：(1)取褶牡蛎，从闭壳肌中抽取血淋巴与抗凝剂混匀，离心后PBS重悬血细胞沉淀，并调节细胞浓度，得到褶牡蛎血细胞悬液；(2)将步骤(1)的血细胞悬液与荧光微球处理液混匀，35～40℃避光孵育1～2h；离心、洗涤、重悬，得到吞噬后的血细胞悬液；(3)将步骤(2)的血细胞悬液与中性红染液混匀，室温避光染色30～40min；离心、洗涤、重悬，得到中性红染色后的血细胞悬液；(4)将步骤(3)的血细胞悬液与丙酮混匀，室温固定5～10min；离心，去除上清液，血细胞沉淀用碘化丙啶溶液重悬，室温孵育15～20min；离心、洗涤、重悬，得到碘化丙啶衬染的血细胞悬液；(5)取步骤(4)的血细胞悬液滴加于载玻片上，分别观察吞噬细胞和吞噬微球，拍照，统计吞噬细胞数和吞噬微球数分析褶牡蛎嗜酸性和嗜碱性粒细胞的吞噬力。
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