[发明专利]长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株及构建方法有效
| 申请号： | 201410174911.6 | 申请日： | 2014-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN103937745A | 公开（公告）日： | 2014-07-23 |
| 发明（设计）人： | 朱月春;陈龙;况应敏;蔡天池;王艳玲;李玉倩 | 申请（专利权）人： | 昆明医科大学 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12N15/866;C12N15/113;C12R1/91 |
| 代理公司： | 云南派特律师事务所 53110 | 代理人： | 张怡 |
| 地址： | 650500 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明属于医学分子生物学领域。本发明所述的长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株是将设计合成的F链5’-GATCCTGGCACAAGAAGATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCATTTTTG-3’和R链5’-AATTCAAAAATGGCACAAGAATATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCAG-3’经退火形成DNA双链，然后插入慢病毒载体pLVX-shRNA2中，再感染A375细胞，使得这一DNA双链整合到A375细胞的基因组中，靶向敲减A375细胞内源性GAS5表达90％以上的稳转细胞株。与传统的反义核酸技术相比，本发明具有特异性强、针对性强、级联放大等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 长链非 编码 gas5 缺陷 a375 细胞株 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种长链非编码GAS5缺陷的人A375稳转细胞株，其特征在于是将设计合成的F链5’‑GATCCTGGCACAAGAAGATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCATTTTTG‑3’和R链5’‑AATTCAAAAATGGCACAAGAATATTAAAACTCGAGTTTTAATCTTCTTGTGCCAG‑3’经退火形成DNA双链，然后插入慢病毒载体pLVX‑shRNA2中，再感染A375细胞，使得这一DNA双链整合到A375细胞的基因组中，靶向敲减A375细胞内源性GAS5表达90％以上的稳转细胞株。
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