[发明专利]血清特异性IgE生物学活性检测方法及其所使用的试剂盒

摘要

本发明提供一种血清特异性IgE生物学活性检测方法及其所使用的试剂盒，该方法以KU812细胞系为指示细胞，诱导表达IgE-Fc受体；将受试者血清与KU812细胞温育，促使血清中的待检sIgE与KU812细胞表面IgE-Fc受体结合；此时，加入特定过敏原，过敏原与KU812细胞表面sIgE结合，导致受体交联并激活KU812细胞，细胞脱颗粒并释放组织胺，同时促进细胞内的CD63分子转移到细胞膜表面。此时，用荧光素标记-抗CD63抗体进行细胞免疫染色，采用流式细胞仪测定表达CD63细胞的百分比，最终确定KU812细胞激活强度。本发明的有益效果是该方法可以评估患者接触过敏原发生过敏的风险程度，同时也可用于评估特异性脱敏治疗的临床效果。

主权项

血清特异性IgE生物学活性检测方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）将KU812细胞系即人外周血嗜碱性白血病细胞中加入待测血清，使KU812细胞表面的IgE‑Fc段受体与待测血清中sIgE抗体的Fc段结合，以此令KU812细胞处于致敏状态；（2）将步骤⑴中处于致敏状态的KU812细胞等分为三组，分别为阳性对照组、阴性对照组和实验组，阳性对照组中加入抗人IgE抗体，阴性对照组加入缓冲液，实验组中加入已知过敏原，以此对各组中的KU812细胞进行激发；（3）分别检测并计算阳性对照组、阴性对照组和实验组中KU812细胞的细胞激活百分比，通过对比各组中KU812细胞的细胞激活百分比来确定待检测血清中特异性IgE致病活性。