[发明专利]采用双核法检测卷烟主流烟气总粒相物遗传毒性的方法有效
| 申请号： | 201410059881.4 | 申请日： | 2014-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN103792218A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 毛健;卢斌斌;李鹏;孙世豪;刘俊辉;谢剑平;张建勋;宗永立 | 申请（专利权）人： | 中国烟草总公司郑州烟草研究院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 郑州中民专利代理有限公司 41110 | 代理人： | 姜振东 |
| 地址： | 450001 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 一种采用双核法检测卷烟主流烟气总粒相物遗传毒性的方法，其特征在于：选用人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞作为评价体系，将细胞接种于培养皿中，加入卷烟烟气总粒相物样品进行暴露，暴露过的细胞经培养和甲醇溶液固定，采用DAPI溶液染色并在荧光显微镜下拍照计数，每个样品计数1000个双核细胞中含微核的细胞数量，与对照样品相比，通过分析微核增加的数量，进而判断烟气遗传毒性的大小。本发明采用烟气作用于人体的靶器官来源细胞进行卷烟烟气遗传毒性评价，针对性更强；实验过程中无需加入代谢活化体系（大鼠肝S9混合液），荧光染色直接在细胞培养皿中进行无需转移至载玻片，具有操作简便，灵敏度高，结果可靠等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 采用 双核法 检测 卷烟 主流 烟气 总粒相物 遗传 毒性 方法 | ||
【主权项】：
一种采用双核法检测卷烟主流烟气总粒相物遗传毒性的方法，其特征在于：该测定方法包括以下步骤：先在培养好的BEAS‑2B细胞中加入卷烟烟气总粒相物（TPM）的提取物样品进行暴露，暴露过的细胞经培养和冷甲醇固定，然后用DAPI溶液荧光染色，选择分布均匀、染色较好的区域，在荧光显微镜下拍照计数，每个样品计数1000个双核细胞中含微核的细胞数量，与不加卷烟烟气总粒相物暴露的对照样品比较，判断卷烟烟气引起细胞微核增加的数量，进而判断卷烟烟气的遗传毒性的大小。
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