[发明专利]一种检测副溶血性弧菌抗体的电化学发光免疫传感器

摘要

本发明公开了一种检测副溶血性弧菌抗体的电化学发光免疫传感器。将石墨粉、灭活副溶血性弧菌组织、牛血清白蛋白充分搅拌混合，加入石蜡的乙醚溶液调剂得到一个均匀碳糊，碳糊在室温下放置使乙醚挥发掉，然后装于聚四氟乙烯管中压紧并与导线连接，在金相砂纸上抛光后，在含1%BSA的磷酸盐缓冲液清洗，构置出易更新的免疫传感器，利用电化学发光方法实现对副溶血性弧菌抗体的测定。标记在溶血性弧菌抗体上的葡萄糖氧化酶（GOD）催化氧化葡萄糖产生H₂O₂，并促使鲁米诺（Luminol）产生电化学发光(ECL)信号。采用竞争酶联免疫法，电化学发光信号随副溶血性弧菌抗体浓度的增加而降低。该传感器对副溶血性弧菌抗体响应良好。

主权项

一种检测副溶血性弧菌抗体的电化学发光免疫传感器，其特征在于通过固体石蜡电极购置电化学发光免疫传感器，具体包括如下步骤： (1)将石墨粉、灭活副溶血性弧菌组织、牛血清白蛋白充分搅拌混合，加入石蜡的乙醚溶液调剂得到一个均匀碳糊。碳糊在室温下放置使乙醚挥发掉，然后装于聚四氟乙烯管中压紧并与导线连接，在金相砂纸上抛光后，在含1%BSA的磷酸盐缓冲液清洗，购置出易更新的工作电极作为免疫传感器，传感器放入含有副溶血性弧菌抗体和葡萄糖氧化酶（GOD）标记副溶血性弧菌抗体培养液中，培育30～120分钟，用洗液冲洗传感器表面，去掉非特异性吸附物质后，放入电化学测试溶液中，溶液为包含1mol/L的葡萄糖、0.6mmol/L的鲁米诺的0.05mol/L的Tris‑HCl（pH为8.5），采用三电极系统进行测试，测量ECL的强度。每次测量前对免疫传感器表面进行更新，旋转免疫传感器的螺母挤出少许生物修饰组分，在金相砂纸（0.03μm）上抛光，并用含1%BSA洗液清洗电极表面即可。