[发明专利]TAT-IL-24-KDEL融合蛋白及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201410016426.6 | 申请日： | 2014-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN103755814A | 公开（公告）日： | 2014-04-30 |
| 发明（设计）人： | 孙爱友;魏东芝;张舰;王晓娟;白超刚;徐瑞;董玉国;张星 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K1/22;C12N15/62;C12N15/70;A61K38/20;A61K47/48;A61P35/00 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 杨元焱 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种TAT-IL-24-KDEL融合蛋白，是指TAT穿膜肽和内质网定位信号肽KDEL分别连接在白细胞介素-24(IL-24)的N端和C端的融合蛋白。其制备步骤包括：PCR扩增获取TAT-IL-24-KDEL编码基因，利用pET28-SUMO作为载体，转化BL21(DE3)，异源表达带有SUMO标签的TAT-IL-24-KDEL融合蛋白。由于融合蛋白以包涵体形式表达，经过变复性、镍柱纯化和标签去除操作后获得高纯度的TAT-IL-24-KDEL融合蛋白。利用流式细胞实验检测纯化的TAT-IL-24-KDEL融合蛋白对乳腺癌MCF-7细胞的促凋亡作用，利用免疫荧光实验检测融合蛋白在胞内的定位情况。本发明首次制备了TAT-IL-24-KDEL融合蛋白，纯度达到92％，能够有效定位于内质网上从而促进乳腺癌细胞MCF-7的凋亡。 | ||
| 搜索关键词： | tat il 24 kdel 融合 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种TAT‑IL‑24‑KDEL融合蛋白，其特征在于：将TAT穿膜肽和内质网定位信号肽KDEL分别融合到IL‑24蛋白的N端和C端，构成TAT‑IL‑24‑KDEL融合蛋白；所述TAT穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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