[发明专利]α-淀粉酶以及对其进行编码的多核苷酸有效

专利信息
申请号: 201380064656.3 申请日: 2013-12-13
公开(公告)号: CN104854238B 公开(公告)日: 2021-04-27
发明(设计)人: G·科沃德-凯利;福山四郎;堤法子;绫部继一 申请(专利权)人: 诺维信公司
主分类号: C12N9/26 分类号: C12N9/26;C12N15/82;C12P7/16
代理公司: 北京市金杜律师事务所 11256 代理人: 陈文平
地址: 丹麦*** 国省代码: 暂无信息
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 本披露涉及具有α‑淀粉酶活性的的分离的多肽、编码这些多肽的多核苷酸、核酸构建体、载体和包括这些多核苷酸的宿主细胞连同包括在乙醇生产工艺中生产这些多肽的方法以及使用这些多肽的方法。
搜索关键词: 淀粉酶 以及 进行 编码 多核苷酸
【主权项】:
一种具有α‑淀粉酶活性的分离的多肽,该分离的多肽选自下组,该组由以下各项组成:(a)一种包括SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6的氨基酸序列的成熟多肽的氨基酸序列的多肽;(b)一种包括与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6的氨基酸序列的成熟多肽具有至少80%序列一致性的氨基酸序列的多肽;(c)一种由与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽编码序列具有至少80%序列一致性的多核苷酸编码的多肽;(d)一种由以下多核苷酸编码的多肽,该多核苷酸在中严格条件下与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:5的成熟多肽编码序列杂交;以及(e)(a)、(b)或(c)的多肽的一个片段,该片段具有α‑淀粉酶活性。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于诺维信公司,未经诺维信公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201380064656.3/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种酸性果胶酶及其突变体-202310914365.4
  • 蔡志强;王天祥;敖大;杨广花;洪婷婷 - 常州大学
  • 2023-07-21 - 2023-10-24 - C12N9/26
  • 本发明属于基因克隆与蛋白质改造技术领域,具体涉及一种酸性果胶酶及其突变体。通过倾向错误技术将来源于曲霉Aspergillus sp.CM96(保藏号:CGMCC No.40340)的野生型酸性果胶酶随机突变,筛选到一种比活力显著提高的酸性果胶酶的突变菌株,该突变体为野生型酸性果胶酶氨基酸序列(SEQ ID NO:1)的第10位氨基酸由丝氨酸突变为丙氨酸,获得的一种果胶酶突变体。
  • 用于抑制肿瘤发展的蛋白质sHYAL-2及其应用-202310922834.7
  • 郝石磊;王伯初;侯瑶;张豪杰 - 重庆大学
  • 2023-07-25 - 2023-10-20 - C12N9/26
  • 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种用于抑制肿瘤发展的蛋白质sHYAL‑2及其应用。提供的用于抑制肿瘤发展的蛋白质,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述蛋白质能够抑制转化生长因子β1(TGF‑β1)介导的肿瘤细胞迁移、抑制肿瘤上皮细胞间质转化的发生并降低透明质酸酶对高分子量透明质酸(HA)的降解,从而抑制肿瘤发展。
  • 一种耐油麦芽淀粉酶及其定向进化方法和应用-202310156733.3
  • 徐瀚麟;黄宗克;余兆硕;孟祥宇;金旋鹭;何方舟;罗思浩;柯李晶;饶平凡 - 安徽华栋山中鲜农业开发有限公司
  • 2023-02-23 - 2023-09-29 - C12N9/26
  • 本发明涉及酶工程领域,尤其涉及一种耐油麦芽淀粉酶及其定向进化方法和应用,所述耐油麦芽淀粉酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述定向进化方法包括以下步骤:(1)通过向PCR反应系统中加Mn2+对基因进行随机突变,构建突变文库;(2)通过三轮高通量筛选,从优选体文库中获得显性优选体,即得所述耐油麦芽淀粉酶。本发明发明者通过易错聚合酶链反应构建了该酶的随机突变文库,以鉴定具有更高活性和耐油稳定性的优选体,然后筛选关键点突变。这一定向进化技术来对麦芽淀粉酶进行筛选,经过进化后筛选出来的麦芽淀粉酶在高油含量下,依然表现出出色的酶活力,同时具有非常不错的耐热与耐酸碱能力。
  • 透明质酸酶突变体及其在水解硫酸软骨素中的应用-202310784916.X
  • 康振;陈坚;堵国成;黄浩;张维娇;王阳;刘平 - 江南大学
  • 2023-06-29 - 2023-08-25 - C12N9/26
  • 本发明涉及透明质酸酶突变体及其在水解硫酸软骨素中的应用,属于生物工程技术领域。本发明的透明质酸酶突变体是将位于水蛭来源透明质酸酶的底物结合口袋中的氨基酸残基进行突变后得到的蛋白质,具体是以氨基酸序列SEQ ID NO.1所示的透明质酸酶为出发序列,将第65位的苯丙氨酸突变为丝氨酸;和/或将第180位苏氨酸突变为精氨酸。本发明应用定向进化技术和方法对透明质酸酶进行了改造,其中,所得双突变体对于硫酸软骨素的催化效率提高了15.9倍,并将其应用于低分子量硫酸软骨素的水解催化,具有重要的应用前景。
  • 利用液相色谱纯化淀粉酶的方法-202310510465.0
  • 郭云;唐桢尧;郭贝亭 - 南京农丰生物科技有限公司
  • 2023-05-08 - 2023-08-15 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种利用液相色谱纯化淀粉酶的方法,属于生物制剂技术领域。其包括以下步骤:(1)粗淀粉酶的制备:准备枯草芽孢杆菌,进行发酵得到发酵液,接着将发酵液进行离心,取上清液,得到粗淀粉酶溶液;(2)粗淀粉酶的纯化:将步骤(1)得到的粗淀粉酶溶液,先选择凝胶过滤,接着施加到色谱柱进行洗脱分离,即得到纯化后的淀粉酶溶液,然后烘干即可。本发明的工艺方法对于淀粉酶的纯化具有明显的提升作用,使用后不仅产率提升,而且酶活力的保留较大。
  • 一种β-淀粉酶突变体及其在麦芽糖制备中的应用-202210692199.3
  • 楼志华;刘翔;张劲楠 - 江苏省奥谷生物科技有限公司
  • 2022-06-17 - 2023-08-15 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种β‑淀粉酶突变体。本发明通过对野生型β‑淀粉酶进行突变,得到所述β‑淀粉酶突变体,与野生型β‑淀粉酶相比,最适温度明显提高,且热稳定性更好,储存稳定性也更佳。本发明所述β‑淀粉酶突变体最适温度为65℃,比野生型β‑淀粉酶最适温度高10℃,热稳定性显著提高。在60‑65℃条件下与普鲁兰酶、麦芽三糖酶协同作用于转化淀粉底物制备麦芽糖,可以实现麦芽糖的高效制备。
  • 一种去除β-淀粉酶中的α-淀粉酶的生产工艺-202310571832.8
  • 孙胜男;于飞;杨辉;张毅 - 烟台麦特尔生物技术有限公司
  • 2023-05-22 - 2023-08-08 - C12N9/26
  • 本发明属于生物技术领域,涉及一种去除β‑淀粉酶中的α‑淀粉酶的生产工艺,包括步骤:S1调浆浸提;S2固液分离;S3超滤;S4换热处理;S5降温处理;S6酸性调节;S7碱液调节;S8精滤;S9再超滤。本发明通过调节pH值以及低温存储的生物技术,使α‑淀粉酶失活达到减少甚至去除大麦β‑淀粉酶中的α‑淀粉酶,同时保护β‑淀粉酶活性并确保料液不会染菌导致β‑淀粉酶酶活损失;提高了大麦β‑淀粉酶纯度及性能,使淀粉糖中的麦芽糖含量提高,麦芽三糖含量降低,可生产出优质的麦芽糖浆以及超高含量麦芽糖浆。
  • 一种定点突变的α-葡萄糖苷酶-202111231828.4
  • 姚冬生;周伟杰;刘大岭;谢春芳;刘桂祯;黄炯威;莫世艺 - 暨南大学;开平牵牛生化制药有限公司
  • 2021-10-22 - 2023-08-01 - C12N9/26
  • 本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域,公开了一种定点突变的α‑葡萄糖苷酶。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑葡萄糖苷酶中制造两个氨基酸取代而产生的;所述的氨基酸取代是第120位和第215位的取代。本发明提供了所述的定点突变的α‑葡萄糖苷酶在制备2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸中的应用。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶能够降低合成AA‑2G时副产物AA‑6G的含量,且提高了AA‑2G产量,其他酶学性质与野生型酶基本一致。
  • 一种复合酶及抗性糊精的制备方法-202110097960.4
  • 徐恩波;刘东红;唐君钰;周建伟;陈健乐;田金虎;程焕;叶兴乾 - 浙江大学
  • 2021-01-25 - 2023-06-30 - C12N9/26
  • 本发明公开一种复合酶以及配合同步挤压制备抗性糊精的方法,属于淀粉精深加工技术领域。本发明基于不同的糖苷键作用位点以选定复配淀粉酶的比例,将复合酶与淀粉进行高剪切共挤压加工,通过挤压腔内的热机械多物理场耦合(μm级非定向剪切)并协同酶解定点解聚作用(nm级专一性剪切),可精细调控淀粉直链和支链的断裂顺序及程度,以形成差异性链长分布。该方法将内置双螺杆腔体作为高效酶解淀粉的反应器,在增大其轴向扩散速率、滞留时间和作用面积的条件下降低酶液用量,形成了高结晶度的抗性糊精(Mw:0.5~8kDa)。本发明简化了挤压前后的酶解步骤,进而实现了一种调控精细、高效连续、节水经济的淀粉微结构域调控方法。
  • 一种α-葡萄糖转苷酶突变体及其应用-202210060953.1
  • 张建涛;张建波;李志敏;胡成才;王志 - 山东恒仁工贸有限公司
  • 2022-01-19 - 2023-06-27 - C12N9/26
  • 本发明涉及一种α‑葡萄糖转苷酶突变体,属于基因工程技术领域。所述α‑葡萄糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示。本发明在深海地衣芽孢杆菌来源α‑葡萄糖转苷酶的基础上,筛选获得两株单点热稳定性提高的突变菌株S204L,A307E以及一株组合突变体S204L/A307E,且突变体在热稳定显著提高的同时,酶的活性不受影响。本发明中的这些突变体比天然α‑葡萄糖转苷酶更适用于工业生产,具有非常巨大的应用前景和产业价值。
  • 一种透明质酸酶突变体、突变基因及其在制备寡聚透明质酸中的应用-202211687722.X
  • 苏移山;朱云峰;朱希强;李作扬;张兆倩 - 山东丰金美业科技有限公司
  • 2022-12-27 - 2023-06-02 - C12N9/26
  • 本发明涉及一种透明质酸酶突变体、突变基因及其在制备寡聚透明质酸中的应用。该透明质酸酶突变体氨基酸序列相对于SEQ ID No.3所示序列仅存在下述突变:第110位的谷氨酸取代为赖氨酸、第409位色氨酸取代为半胱氨酸、第519位天冬酰胺取代为色氨酸、第525位丙氨酸取代为甘氨酸、第532位天冬氨酸取代为脯氨酸。本发明以肺炎链球菌Streptococcus pneumonia SP098的野生型透明质酸酶hyl为基础,选择第110位、第409位、第519位、第525位和第532位的氨基酸进行迭代饱和突变。与野生型透明质酸酶hyl相比,透明质酸酶突变体hyl‑E110K‑W409C‑D532P‑N519W‑A525G的酶活力提高了3.73倍,达到21.3×105U/mL,应用该透明质酸酶突变体进行寡聚透明质酸的生产,最高发酵产量可以达到50.5g/L。
  • 一种茶树中性/碱性转化酶CsINV2蛋白及其制备方法和应用-202310104429.4
  • 钱文俊;李波;王缓;王玉;丁兆堂 - 青岛农业大学
  • 2023-02-07 - 2023-05-23 - C12N9/26
  • 本发明提供了一种茶树中性/碱性转化酶CsINV2蛋白及其制备方法和应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明所述制备方法,包括:采用BamHⅠ对pMAL‑C2X质粒进行单酶切反应,将得到的载体片段与CsINV2基因连接,得到重组质粒pMAL‑C2X‑CsINV2,转化到表达菌株中,获得重组菌株;将所述重组菌株经培养后得到的菌液破碎、离心,得到上清粗蛋白,用过柱法纯化所述上清粗蛋白,得到茶树中性/碱性转化酶CsINV2蛋白。采用本发明的方法能够克服中性/碱性转化酶因蛋白不稳定和很难纯化的问题,为工业化生产葡萄糖和果糖提供强有力的技术支撑。
  • 一种高纯度玻璃酸酶的制备工艺-202110984911.2
  • 刘兰花;陈备战;杨益辉;王泽民 - 南昌市万华生化制品有限公司
  • 2021-08-26 - 2023-05-12 - C12N9/26
  • 本发明提供了一种高纯度医用级玻璃酸酶的制备工艺,采用亲和层析梯度法纯化,通过不同粒径的改性成分处理制得的改性琼脂糖凝胶CL‑4B作为凝胶载体,将多粘菌素B承载于其中,大幅提升了亲和层析柱的有效吸附量;超滤浓缩步骤中采用微孔滤膜进行除菌过滤,细菌截留率高,同时,针对目前微孔滤膜频繁使用易出现孔隙增大,截留量降低的问题,采用1,5,7‑三叠氮双环(4.4.0)癸‑5‑烯、胶木粉、芦荟提取物为原料的改性剂处理制备铸膜液,大幅提高了常规苯胺、聚醚酰亚氨制备的滤膜的拉伸强度,延长了滤膜的耐用性;同时针对拉伸强度提高导致抗冲击强度一般的问题,发明人通过研究改进致孔剂,在致孔效果不影响的情况下,拉伸强度和抗冲击强度也同时达到平衡。
  • 一种热稳定性提高的α-葡萄糖苷酶环化突变体及其构建方法-202210967823.6
  • 张显;饶志明;王志;胡孟凯;徐美娟;杨套伟 - 江南大学
  • 2022-08-12 - 2023-05-05 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种热稳定性提高的α‑葡萄糖苷酶环化突变体及其构建方法,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明在嗜热厌氧乙醇菌来源α‑葡萄糖苷酶的基础上,通过不同的异肽键来使蛋白环化,获得了三株热稳定性提高的突变菌株SpyTag‑AGL‑SpyCatcher、SnoopTag‑AGL‑SnoopCatcher和SdyTag‑AGL‑SdyCatcher,突变体在热稳定显著提高的同时,酶的活性发生明显的降低。本发明中的这些环化突变体比天然α‑葡萄糖苷酶更适用于工业生产且构建方式简单,具有非常巨大的应用前景和产业价值。
  • 复合酶制剂及其用途和使用方法-202011496644.6
  • 刘帅;陈颖豪 - 刘帅;陈颖豪
  • 2020-12-17 - 2023-05-02 - C12N9/26
  • 本申请公开一种复合酶制剂,包括以下组分:β‑1,4‑葡聚糖酶,酶活力为50~10000U/g,1~3.5份;β‑1,3‑葡聚糖酶,酶活力为50~10000U/g,1~3.5份。所述复合酶制剂的使用方法,其包括以下步骤:制备复合酶制剂浓缩液;将所述复合酶制剂浓缩液按照1:1000~5000的比例进行稀释形成稀释液;将所述稀释液分别作用在待嫁接的砧木和接穗的切口处;用塑料膜薄紧密缠绕砧木和接穗的接驳处,直至嫁接愈合和成活。本申请的复合酶制剂,依靠体外施用的方式即可发挥作用,并且处理时间短,有利于在农业和园艺生产领域广泛应用。
  • 一种高活性的透明质酸酶突变体及其制备寡聚透明质酸盐的应用-202310058065.0
  • 杨琥;刘超;王淳霖;胡远;王朝东 - 武汉启瑞药业有限公司
  • 2023-01-17 - 2023-04-25 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种高活性的透明质酸酶突变体及其制备寡聚透明质酸盐的应用,属于酶工程和生物工程技术领域。本发明提供了一种透明质酸酶突变体,其在野生型透明质酸酶SEQ ID No.1所示的氨基酸序列的基础上,具有位于第27位天冬氨酸、第175位天冬酰胺、第220位蛋氨酸、第297位丝氨酸、第335位甘氨酸和第342位赖氨酸中的至少一者的突变,相对于野生型的透明质酸酶而言,酶活提高了至少20%,该突变体酶水解大分子的透明质酸或其盐得到寡聚透明质酸或其盐混合物分子量在300~2000Da,底物转化率达到95%以上。本发明的透明质酸酶突变体显著提高酶活,有助于降低生产成本,提高生产效率,为工业化生产吨级寡聚透明质酸或其盐奠定了基础。
  • 一种β-淀粉酶突变体及其应用-202211130008.0
  • 张显;饶志明;房鸣;胡孟凯;徐美娟 - 江南大学
  • 2022-09-16 - 2023-03-28 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种β‑淀粉酶突变体及其应用,属于基因工程技术领域。本发明提供的β‑淀粉酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β‑淀粉酶的第252位和/或第503位的氨基酸进行定点突变获得的。本发明在天然β‑淀粉酶的基础上,通过理性设计,结合定点突变生物技术改造β‑淀粉酶分子结构,分析了突变后残基对酶热稳定性的影响,并最终获得了稳定性提高的突变体G252T、F503S及组合突变体G252T/F503S,本发明的β‑淀粉酶突变体在热稳定显著提高的同时酶的活性不受影响,本发明的β‑淀粉酶突变体比野生型更适合于催化淀粉生成麦芽糖的应用,更利于生产工艺的灵活性。
  • 一种用于馓子生产的复配酶制剂及其使用方法-202011523713.8
  • 熊晓燕;王冠;李洋;张立;詹志春;周樱 - 武汉新华扬生物股份有限公司
  • 2020-12-22 - 2023-03-24 - C12N9/26
  • 本发明公开了一种用于馓子生产的复配酶制剂及其使用方法,其中,复配酶制剂包括酶组合物,酶组合物由α‑淀粉酶、葡糖淀粉酶、木聚糖酶和木瓜蛋白酶组成;使用方法是将复配酶制剂添加到制作馓子的面粉中,其中酶组合物和面粉的用量比例为11~44:10000。该复配酶制剂可提升馓子品质,改善馓子的外观和口感,绿色安全。使用方法对原馓子加工过程基本无影响,仅多了投料酶制剂并混匀这一简单操作,原有馓子制作流程无须调整,使用简单。
  • 碱性淀粉酶突变体及其应用-202211662114.3
  • 王克芬;佟新伟;王兴吉;郭庆文;张杰;刘文龙 - 山东隆科特酶制剂有限公司
  • 2022-12-23 - 2023-03-17 - C12N9/26
  • 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及碱性淀粉酶突变体及应用。本发明对来源于嗜碱芽孢杆菌的碱性淀粉酶氨基酸序列中第57、152、203、223、294、345和392位点的氨基酸M、V、Y、V、V、Y和D分别突变为I、I、D、I、G、C和N,获得碱性淀粉酶突变体,所述突变体具有耐碱、耐热的特点,同时将含有突变基因的重组表达载体,转入解淀粉芽孢杆菌ZD‑708(△GAΔEGL)中进行表达,在60m3发酵罐中平均酶活水平达到31243U/mL,能进一步降低碱性淀粉酶的生产成本,促进碱性淀粉酶在纺织和洗涤行业的广泛应用。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top