[发明专利]洋槐蜜中掺有油菜蜜的鉴别方法

摘要

本发明公开了一种鉴别洋槐蜜中掺入油菜蜜的方法，首先用树脂从蜂蜜中提取出酚酸类化合物，并用色谱纯甲醇定容制成供试品溶液；再分别取一定量的十种酚酸对照品，用色谱纯甲醇定容配制成对照品溶液。测定方法是分别吸取对照品溶液与供试品溶液注入高效液相色谱仪，以对照品为参照物，测定并记录色谱图，得到洋槐蜜的HPLC-ECD指纹图谱，再用同样的方法得到油菜蜜和掺入油菜蜜的洋槐蜜的HPLC-ECD指纹图谱，将三者进行比较并结合化学计量学的方法来鉴别洋槐蜜中是否掺入油菜蜜。本发明设计合理，分离效果好、灵敏度高、可行性强，解决了洋槐蜜掺假鉴别及质量控制中的一个重要的技术问题。

主权项

1.一种洋槐蜜中掺有油菜蜜的鉴别方法，其特征在于包括以下步骤：（1）取重量份13份没食子酸、13份原儿茶酸、810份对羟基苯甲酸、13份绿原酸、13份咖啡酸、13份丁香酸、13份p香豆酸、13份阿魏酸、13份鞣花酸和13份迷迭香酸十种酚酸标准品用色谱纯甲醇溶解并定容，配制成对照品溶液；（2）将纯洋槐蜜、纯油菜蜜及掺有质量百分含量5%～50%油菜蜜的洋槐蜜样品加蒸馏水溶解，调节pH为2～3得到蜂蜜水溶液，蜂蜜水溶液通过装填有XAD2、LS46D、DM130、LS08或AB8树脂的层析柱，分别用pH为2～3的盐酸水溶液和蒸馏水冲洗柱子，再用甲醇洗脱，蒸干洗脱液得到的残留物用色谱纯甲醇溶解并定容，配制成供试品溶液；（3）分别吸取对照品溶液与供试品溶液注入高效液相色谱仪中，得到对照品色谱图和纯洋槐蜜，纯油菜蜜以及掺有油菜蜜的洋槐蜜的HPLCECD（高效液相色谱串联电化学检测器）指纹图谱；（4）吸取加有对照品溶液的供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中，测定并记录色谱图，分别得到加有对照品溶液的纯洋槐蜜和纯油菜蜜的HPLCECD图谱；（5）将纯洋槐蜜的HPLCECD指纹图谱和纯油菜蜜的HPLCECD指纹图谱对比，保留时间21.15min为绿原酸的共有峰，保留时间56.26min为鞣花酸的共有峰，这两个峰作为鉴别洋槐蜜和油菜蜜的特征峰；（6）以十种酚酸的含量为参数，运用化学计量学中主成分分析的方法对蜂蜜样品进行分析，样品被分为三类，第一类是纯洋槐蜜，第二类是纯油菜蜜，第三类是掺有5%以上油菜蜜的洋槐蜜；（7）将通过主成分分析得到的两个主成分X₁和X₂作为Fisher判别分析的两个判别指标，带入判别函数F1、F2和F3中，求得Fisher判别函数大小，数值最大的即为相应类别，F1=-1.564X₁+42.471X₂-17.434F2=-67.055X₁-53.279X₂-67.556F3=-12.255X₁+24.581X₂-11.561其中，X₁为主成分1;X₂主成分2；F1为纯洋槐蜜的判别函数，F2为纯油菜蜜的判别函数；F3为掺有5%以上油菜蜜的洋槐蜜的判别函数。