[发明专利]鱼类初期胚胎发育的DAPI染色方法有效
申请号: | 201310592620.4 | 申请日: | 2013-11-22 |
公开(公告)号: | CN103674662A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 李雅娟;周贺;王玉生;刘博;高养春 | 申请(专利权)人: | 大连海洋大学;李雅娟 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人: | 田和穗 |
地址: | 116000 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开一种鱼类初期胚胎发育的DAPI染色方法,其特征在于:所述的方法按如下步骤进行:受精10min后开始取卵,每10min取10-20个受精卵,取样到四细胞期,用多聚甲醛固定液固定24h;将固定后的受精卵换入到PBS中浸泡,并在36h后更换一次PBS,于4℃冷藏;取冷藏卵放入事先加入PBS的培养皿中,去除卵膜和植物极,并将动物极放入装有PBS的离心管中,避光;吸出离心管中的PBS,向离心管中加入Tween20和5μg/ml的DAPI染色液,且Tween20和DAPI染色液的体积比为1:100,将离心管放入摇床中进行染色10-30min。 | ||
搜索关键词: | 鱼类 初期 胚胎 发育 dapi 染色 方法 | ||
【主权项】:
一种鱼类初期胚胎发育的DAPI染色方法,其特征在于:所述的方法按如下步骤进行:a. 受精10min后开始取卵,每10 min取10‑20个受精卵,取样到四细胞期,用多聚甲醛固定液固定24 h;b. 将固定后的受精卵换入到PBS中浸泡,并在36h后更换一次PBS,于4℃冷藏;c. 取冷藏卵放入事先加入PBS的培养皿中,去除卵膜和植物极,并将动物极放入装有PBS的离心管中,避光; d. 吸出离心管中的PBS,向离心管中加入Tween20和5μg/ml的DAPI染色液,且Tween20和DAPI染色液的体积比为1:100,将离心管放入摇床中进行染色10‑30min。
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