[发明专利]从虾夷马粪海胆体腔液中提取调理素的方法无效
| 申请号： | 201310580435.3 | 申请日： | 2013-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN103665134A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 李丹彤;张颖;常亚青;宋坚 | 申请（专利权）人： | 大连海洋大学;李丹彤 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16 |
| 代理公司： | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人： | 高学刚 |
| 地址： | 116000 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开一种从虾夷马粪海胆体腔液中提取调理素的方法，其特征在于：所述的方法按照以下步骤进行：首先从虾夷马粪海胆的围口膜处抽取海胆体腔液，并在3500-5000r/min的条件下离心10-15min，制得海胆无细胞体腔液；将海胆无细胞体腔液通过截留分子量为3.5kDa的透析膜进行透析脱盐，并在4-6℃的环境下于透析缓冲液中透析60h，所用的透析缓冲液为0.01mol／L的Tris-HCI和0.005mol／LCaCI2的混合溶液，pH8.0，每15h更换一次透析缓冲液，共更换4次；采用SephadexG-200凝胶过滤层析柱进行洗脱，并收集洗脱后的各组分，层析过程中选用CaCI2-Tris缓冲液洗脱；将洗脱的各组分经紫外分光光度计在280nm下测定其中各组分的吸光值，确定峰值，出现峰值一组或几组即为含有调理素的组分。 | ||
| 搜索关键词： | 马粪 海胆 体腔 提取 调理 方法 | ||
【主权项】：
一种从虾夷马粪海胆体腔液中提取调理素的方法，其特征在于：所述的方法按照以下步骤进行：首先从虾夷马粪海胆的围口膜处抽取海胆体腔液，并在3500‑5000r/min的条件下离心10‑15min，制得海胆无细胞体腔液；将海胆无细胞体腔液通过截留分子量为3.5kDa的透析膜进行透析脱盐，并在4‑6℃的环境下于透析缓冲液中透析60h，所用的透析缓冲液为0.01mol／L 的Tris‑HCI和0.005 mol／LCaCI2的混合溶液，pH 8.0，每15h更换一次透析缓冲液，共更换4次；采用Sephadex G‑200凝胶过滤层析柱进行洗脱，并收集洗脱后的各组分，层析过程中选用CaCI2‑Tris缓冲液洗脱；将洗脱的各组分经紫外分光光度计在280nm下测定其中各组分的吸光值，确定峰值，出现峰值一组或几组即为含有调理素的组分。
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