[发明专利]冬虫夏草中虫草酸含量的近红外检测方法

摘要

本发明公开了一种冬虫夏草中虫草酸含量的近红外检测方法，主要包括下述步骤①采集冬虫夏草校正集样品原始光谱；②校正集样品原始光谱预处理；③主成分数的确定；④校正模型的建立；⑤模型的验证；⑥待测样品中虫草酸含量测定；本发明的检测方法通过采集冬虫夏草校正集样品原始光谱，采用多元散射校正、二阶导、Savitzky-Golay平滑进行光谱预处理，确定冬虫夏草中虫草酸的主成分数，通过校正模型的建立及验证，再进行冬虫夏草中虫草酸含量检测，具有检测速度快，成本低，检测结果准确的特点，对样品不会造成污染，可以回收利用，有利于环境保护与职业健康安全。

主权项

冬虫夏草中虫草酸含量的近红外检测方法，其特征在于由下述步骤组成：  ①采集冬虫夏草校正集样品原始光谱    收集市面上销售的冬虫夏草样品，将样品35℃下鼓风干燥3天后初磨至毫米级，再用南京南大球磨机粉碎至0.1μm级，得冬虫夏草粉末；在25℃下开启近红外光谱仪预热30分钟，取0.5g冬虫夏草粉末于直径32mm，厚度15mm的旋转样品杯中，积分球漫反射方式采集光谱，光谱采集范围4000‑10000cm‑1，分辨率8cm‑1，扫描次数32，增益2x；为了克服样品粒度差异引起的光谱漂移，减少误差，每个样品重复装样3次，得到校正集样品原始光谱，将该校正集样品原始光谱的计算平均值存于计算机软件中；②校正集样品原始光谱预处理     将步骤①所得到的冬虫夏草校正集样品原始光谱，采用多元散射校正、二阶导、Savitzky‑Golay平滑进行光谱预处理；③主成分数的确定    将预处理后的校正集样品光谱中的信息数据变换到主成分数为2‑10个互不相关的变量中，完成特征信息数据的提取；冬虫夏草中虫草酸的主成分数为5；④校正模型的建立      A.冬虫夏草样品中虫草酸含量的化学测定值供试品溶液制备  称取步骤①中的冬虫夏草粉末0.1g至具塞锥形瓶中，精密称定，加入水25mL，称定重量，超声提取30min，称重，补足减失重量，以0.45μm滤膜过滤，取滤液作为供试品溶液备用；对照品溶液制备   精密称取55.51mg虫草酸对照品于50mL容量瓶中，以水溶解定容，摇匀，即得浓度为1093.547mg/L的虫草酸对照品溶液原液，再分别精密量取对照品原液0.5mL、1.0mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得到浓度分别为54.67735mg/L、109.3547 mg/L、218.7094 mg/L、437.4188 mg/L、656.1282 mg/L的对照品溶液；建立标准曲线   虫草酸的色谱分析采用氨基色谱柱，流动相为乙腈‑水，体积比为83:17，流速1.0mL/min，进样体积：10μL，柱温：30℃，蒸发光散射检测器进行检测，漂移管温度为100℃，雾化气体流速为2.5L/min；在上述色谱条件下进行对照品溶液的色谱分析，得到各浓度对照品溶液的虫草酸色谱峰的峰面积，以浓度的对数为横坐标，相对应的色谱峰面积的对数为纵坐标建立标准曲线；供试品溶液的色谱分析   按上述建立标准曲线中所述的色谱条件进行供试品溶液的色谱分析，得到供试品溶液的虫草酸色谱峰的峰面积，带入标准曲线中计算即得到供试品溶液中虫草酸的含量的化学测定值；B. 以A步骤中冬虫夏草虫草酸含量的化学测定值为校正值，将步骤③所得特征信息数据作为自变量，校正值作为因变量，用偏最小二乘法建立自变量与因变量之间的校正模型；⑤模型的验证取步骤①已知虫草酸含量的冬虫夏草样品，重复步骤①‑③后，利用步骤④校正模型得到已知虫草酸含量的冬虫夏草样品中虫草酸含量的计算值，计算计算值与实际值的相关系数和方差，评价步骤④所得校正模型的可靠性;⑥待测样品中虫草酸含量测定取待测冬虫夏草样品，重复步骤①至步骤③，将步骤③所得特征信息数据输入步骤④所得校正模型中，即可得到待测冬虫夏草样品中的虫草酸含量。