[发明专利]胎菊毛细管电泳指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明提供了一种胎菊毛细管电泳指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱，包括水、醇两种方法先后提取胎菊样品制备供试品溶液，自制碳电极和铜电极作为检测电极，选择优化毛细管电泳分析条件，测定供试品溶液，确定胎菊的指纹图谱等步骤。本发明分析了10种来源于不同产地和批次胎菊产品的图谱，通过相关系数法和夹角余弦法分析，确定了24个共有的特征峰，得到了标准指纹图谱。本发明提取方法简便，分析方法严谨，特征峰多，能全面的表达胎菊中活性成分的信息，可以作为胎菊质量的有效表征。

主权项

1.一种胎菊毛细管电泳指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱，其特征在于包括以下步骤： （1）供试品的制备 取胎菊样品，粉碎后置于水溶液中，超声，再在90℃下恒温水浴30min，取出离心，过滤，上层清液作为供试品1备用；滤渣中加入乙醇溶液，超声后，离心，过滤，上层清液作为供试品2备用；（2）电极的制备 铜电极制作：废弃铜丝用砂纸打磨，并将其置于去胶皮帽的滴管中，用胶固定即得；碳电极制作： 用砂纸打磨0.3mm铅笔芯和细铜丝，并将细铜丝缠绕在铅笔芯上，电烙镀锡后，置于去胶皮帽的滴管中，胶固定即得；（3）毛细管电泳分析条件 供试品1的毛细管电泳分离检测条件：缓冲液：pH9.24硼砂为分离缓冲液，0.1mol/l 氢氧化钠为最佳检测缓冲液；分离电压：20kv；检测电极：自制的铜电极；检测电位：0.67V；进样时间：8s；供试品2毛细管电泳分离检测条件：运行缓冲液：pH11.25的硼砂－氢氧化钠溶液；分离电压：14kV；检测电极：自制的碳电极，检测电位：0.95 V；进样时间：8s；（4）构建指纹图谱 按照前述的方法分析10种来源于不同产地和批次的胎菊样品，运用相关系数和夹角余弦法，通过比较，以相对保留时间RSD相差小于5%为选择标准，确定了24个共有特征峰，其中供试品1中有12个共有特征峰，供试品2中有12个共有特征峰，这些特征峰反应了胎菊的指纹特征，共同作为胎菊的标准指纹图谱。