[发明专利]啤酒酵母可溶性1,3-β-D-葡聚糖的生物提炼及纯化方法

摘要

本发明涉及一种啤酒酵母可溶性1,3-β-D-葡聚糖的生物提炼及纯化方法。目前对酵母细胞壁中可溶性1,3-β-D-葡聚糖的提取，工艺不具备连续性。本发明在同一反应体系中，利用超声波、中性蛋白酶、甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶将酵母细胞进行降解，利用截留分子量在10-50kD超滤膜，对其中分子量的10-50kD的可溶性1,3-β-D-葡聚糖进行抽提，得到分子量在10-50kD的可溶性1,3-β-D-葡聚糖。本发明具有工艺流程短、生产安全性高、产品的分子量范围固定的优点，所获产品具有溶解性高、稳定性好、安全性高的特点，适用于食品、医药、化妆品、农药、新材料、电子、环保等领域。

主权项

1.啤酒酵母可溶性1，3-β-D-葡聚糖的生物提炼及纯化方法，其特征在于：由以下步骤实现：步骤一：发酵罐底取新鲜酵母泥120-890g，以过量蒸馏水反复洗涤，每分钟4000转离心20分钟，直到上清液无色清澈、苯酚-硫酸法测不到糖为止；步骤二：补水到5Ｌ，搅拌，固形物含量为2-15%，把超声波细胞粉碎仪的超声波发生器置于混合液中，超声功率400-600W，工作时间5-10秒，间隔时间10秒，总超声时间20-30分钟，进行破壁；步骤三：继续补水5Ｌ进行稀释，调pH值6.0-8.0，煮沸后冷却到50±2℃，按酵母干重的0.5-1.5%添加甘露聚糖酶，按200-250U/g添加中性蛋白酶，反应24-28小时；步骤四：调pH5.0，按酵母干重的0.5-1.5%添加β-葡聚糖酶，反应4小时后取30%，离心分离，收集上清液，不溶物质返回最初反应体系中，同时补水到开始反应时的体积，此过程不断循环，5-16小时后终止反应，合并上清液；步骤五：上清液煮沸，降温到40℃，在0.2MPa条件下，使料液先通过PES-10，30分钟，截留分子量10kD，收集透过液，使之再通过PES-50，30分钟，截留分子量50kD，在此过程中不断补充上清液，采取外源冷循环水降温的方法使温度恒定在40℃；步骤六：收集PES-50的浓缩液直到膜通量低于25L/m^-2h^-1，将浓缩液真空回旋干燥，得到干粉状可溶性1,3-β-D-葡聚糖。