[发明专利]玉米S型胞质雄性不育育性恢复基因Rf3的定位新方法

摘要

本发明属于玉米基因定位技术领域，具体涉及一种定位玉米S型胞质雄性不育育性恢复基因Rf3的新方法。对质量性状基因进行定位的常规方法是构建回交或自交群体，通过表型鉴定推断个体的基因型并进行分子标记检测，利用两点和三点测验确定基因的位置。常规方法对Rf3基因进行定位时，表型鉴定易受人为、环境因素影响且工作量大限制定位群体大小。本发明针对常规方法定位Rf3基因的缺点，提出一种不需要进行表型鉴定的定位方法，其特征是利用的定位群体基因型已知，表型无需鉴定，可以构建大群体，在一个世代可以找到充足的重组个体对Rf3基因进行精细定位。本发明为定位Rf3基因提出了一种有效的方法，促进生产上利用Rf3基因进行三系不育化制种。

主权项

一种定位玉米S型胞质雄性不育育性恢复基因Rf3的新方法，其特征在于：(1)以带有恢复基因的玉米自交系SD13(S(Rf3／Rf3))为母本，郑58(N(rf3／rf3))为父本，组配F1(S(Rf3／rf3))；(2)以F1为父本，郑58为母本，组配定位群体(N(Rf3／rf3))；(3)定位群体单粒种子提取DNA；(4)随机挑选部分个体(n≥200)用玉米2号染色体长臂上的分子标记进行检测，利用两点测验的方法寻找与Rf3基因紧密连锁的分子标记，利用三点测验的方法绘制这些标记与Rf3基因的遗传图谱，将Rf3基因初定位在某两个分子标记之间；(5)在初定位区间内寻找和开发分子标记，并用其检测整个定位群体，寻找在初定位区间内部发生重组的个体，根据重组发生的位置精细定位Rf3基因。