[发明专利]一种转座因子载体及其转基因后代的筛选方法无效
| 申请号： | 201310286311.4 | 申请日： | 2013-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN103352049A | 公开（公告）日： | 2013-10-16 |
| 发明（设计）人： | 瞿绍洪;赵建华;李军;周洁;汪得凯;陶跃之 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 | 代理人： | 鲁秦 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种产生无选择标记转基因植物的转座因子载体及其转基因后代的筛选方法，该载体通过以下步骤构建：1）将绿色荧光蛋白基因(GFP)、潮霉素抗性选择标记基因(HPT)、来源于玉米的Ac转座酶基因（AcTPase）和Ds转座因子串联组装在一起，构建转座因子载体pLJ26，其中Ds因子不带有任何选择标记，并且预先在其内部设计一个AscI单酶切位点；2）构建一个在多克隆位点两侧均含有AscI酶切位点的中间载体pLJ16，以组装任意目的基因，然后将目的基因切下并克隆到Ds因子内部。本发明把基于GFP荧光标记的负选择技术与基于PCR的正选择技术相结合，在转基因后代依次淘汰含有T-DNA的个体和选择含有目的基因的无选择标记个体，从而提高转基因后代的筛选效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 因子 载体 及其 转基因 后代 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种转座因子载体，其特征是：通过以下步骤构建：1）将绿色荧光蛋白基因(GFP)、潮霉素抗性选择标记基因(HPT)、来源于玉米的Ac转座酶基因（AcTPase）和Ds转座因子串联组装在一起，构建转座因子载体pLJ26，其中Ds因子不带有任何选择标记，并且预先在其内部设计一个AscI单酶切位点；2）构建一个在多克隆位点两侧均含有AscI酶切位点的中间载体pLJ16，以组装任意目的基因，然后将目的基因切下并克隆到Ds因子内部。
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