[发明专利]丹蒌片指纹图谱检测方法

摘要

本发明涉及一种丹蒌片指纹图谱检测方法，其中色谱条件为：以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以乙腈为A相，0.1%甲酸水溶液为B相组成流动相，采用梯度洗脱方式，检测波长为280±2nm，250±2nm流速0.5-1.5mL/min，柱温20-50℃，进样量1-25μl；指纹图谱共有特征指纹峰15个，其峰面积综合占总峰面积的90%以上；5号色谱峰是葛根素的特征峰，葛根素特征峰的相对保留时间和相对保留面积为1，计算其他峰的相对保留时间和相对峰面积，即得到丹蒌片的标准指纹图谱共有特征峰。本发明方法具有精密度高、稳定、重现性好、加样回收率高、方法简便的特点，能快速、准确地鉴别产品的真伪优劣。

主权项

一种丹蒌片指纹图谱检测方法，其特征在于该方法为： 取丹蒌片，研磨，称取粉末0.2‑0.5g，加入50‑80%甲醇溶液，超声提取20‑50min，放至室温，用甲醇补足重量，摇匀，离心，取上清液，即得供试品溶液； 其中色谱条件为：以十八烷基键合硅胶柱为填充剂，以乙腈为A相，0.1%甲酸水溶液为B相组成流动相；采用梯度洗脱方式，其洗脱时间与流动相比例为：0‑4min，A相：4‑10%、B相：96‑90%，4‑23min，A相：10‑14%、B相：90‑86%，23‑25min，A相：14‑20%、B相：86‑80%，25‑28min ，A相：20‑21%、B相：80‑79%，28‑33min，A相：21‑22%、B相：79‑78%，33‑43minA相：22‑40%、B相：78‑60%，43‑48min，A相：40‑90%、B相：60‑10%，48‑53min，A相：90‑100%、B相：10‑0%；检测波长为280±2nm，250±2nm流速0.5‑1.5mL/min，柱温20‑50℃，进样量1‑25μl； 对照品标准液的制备：取5‑羟甲基糠醛、丹参素、葛根素、大豆苷、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮ⅡA对照品适量，精密称重，加甲醇或乙醇或乙腈，制得5‑羟甲基糠醛浓度为0.443‑14.175μg/mL、丹参素浓度为3.85‑123.1μg/mL、葛根素浓度为11.625‑372μg/mL、大豆苷浓度为3.83‑122.5μg/mL、丹酚酸B浓度为4.93‑157.75μg/mL、丹酚酸A浓度为2.45‑78.46μg/mL、丹参酮ⅡA浓度为0.1992‑6.375μg/mL的混合对照品溶液，与供试品溶液相同色谱条件进行测定，得到各自特征峰的保留时间； 测定法：将供试品溶液注入高效液相色谱仪即得; 所述丹蒌片由如下原料份的原料药制成：瓜蒌皮30‑145份、薤白15‑65份、葛根55‑220份、川芎20‑85份、丹参55‑220份、赤芍20‑85份、泽泻55‑220份、黄芪50‑180份、骨碎补10‑40份和郁金20‑85份。