[发明专利]桦褐孔菌多糖作为鱼类饲料添加剂的应用

摘要

本发明公开了一种桦褐孔菌多糖作为鱼类饲料添加剂的应用，桦褐孔菌多糖在鱼类基础饲料中的添加量为1‑20g/kg鱼类基础饲料。本发明采用桦褐孔菌多糖加入鱼类饲料中，以代替抗生素药物和疫苗的使用，不会产生抗药性且使用成本低，能有效提高养殖鱼类的生长性能、免疫力和抗氧化能力，拓宽了桦褐孔菌多糖的应用范围，为鱼类饲料的开发提供了新途径，促进了鱼类养殖业的可持续发展。

主权项

一种桦褐孔菌多糖作为鱼类饲料添加剂的应用，其特征在于：桦褐孔菌多糖在鱼类基础饲料中的添加量为1‑20g/kg鱼类基础饲料；所述桦褐孔菌多糖由以下工艺制备获得：（1）菌种活化：以桦褐孔菌为菌种，接种至斜面菌种培养基上培养，获得活化菌种；（2）液体菌种培养：将活化菌种转入液体种子培养基中，摇床培养至对数期得液体菌种；（3）液体深层发酵：将液体菌种接入液体深层发酵培养基中发酵培养，液体菌种与液体深层发酵培养基的体积比为1:8‑10，所述液体深层发酵培养基的配方为：葡萄糖30‑32g/L，木质纤维素32‑38g/L，蛋白胨 2‑5g/L，KH2PO4 1‑2g/L，ZnSO4·2H2O 0.01‑0.02g/L， K2HPO4 0.3‑0.5g/L，FeSO4·7H2O 0.03‑0.07g/L，MgSO4·7H2O 0.3‑0.6 g/L，CuSO4·5H2O 0.01‑0.03 g/L，CoCl2 0.01 ‑0.02g/L，MnSO4·H2O 0.06‑0.09 g/L，pH值6.0‑6.5；液体深层发酵的工艺参数为：发酵温度27‑28℃，发酵罐空气流量0.5‑1.0vvm，发酵罐内部压力0.1‑0.25 kg/cm3，搅拌转速70‑150转/分钟，发酵周期12‑14天；（4）桦褐孔菌多糖提取：从发酵产物中提取桦褐孔菌多糖；从发酵产物中提取桦褐孔菌多糖的具体步骤为：a、发酵产物过滤，得菌丝体和发酵液，发酵液浓缩至原体积的20%‑30%，加入4‑6倍体积的无水乙醇，搅拌均匀后在0‑4℃下静置过夜，离心分离去上清液，沉淀冷冻干燥后得桦褐孔菌胞外多糖；b、将菌丝体水洗后，菌丝体悬浮于蒸馏水中，超声破壁， 121±1℃加热1.5‑2h，冷却后离心收集上清液，残渣悬浮于蒸馏水中，121±1℃加热3‑4h，冷却后离心收集上清液，合并上清液，浓缩至原体积的20%‑30%，加入4‑6倍体积的95%‑98%的乙醇，搅拌均匀后在0‑4℃下静置过夜沉淀，所得沉淀依次用95%‑98%的乙醇和丙酮洗涤后，冷冻干燥得桦褐孔菌胞内多糖；c、将a步的桦褐孔菌胞外多糖和b步的桦褐孔菌胞内多糖混合均匀后即为桦褐孔菌多糖；所述木质纤维素选自农作物秸秆、木屑、花生壳、甘蔗渣中的一种；所述斜面菌种培养基的配方为：麦芽浸膏40 g/100mL，蛋白胨4 g/100mL，琼脂10 g/100mL，pH值为5.4‑5.6；斜面菌种培养基上培养的参数为：温度27‑28℃，培养200‑250小时；所述液体种子培养基的配方为：葡萄糖 5g/100mL，蛋白胨 0.5g/100mL，酵母浸膏 0.1g/100mL，KH2PO4 0.1 g/100mL，MgSO4 0.15 g/100mL，CaCl2 0.01 g/100mL；液体菌种培养的参数为：温度27‑28℃，培养3.5‑4.5d，摇床转速80‑140转/分钟。