[发明专利]适配体-纳米金共振瑞利散射光谱测定塑料制品双酚A的方法

摘要

本发明公开了一种适配体-纳米金共振瑞利散射光谱测定塑料制品双酚A的方法，主要是利用在pH7.6Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液下，纳米金-双酚A适配体探针发生非特异性聚集，溶液颜色为紫色，在520nm处有一个较强的共振瑞利散射峰。随着双酚A浓度的增大，纳米金-双酚A适配体探针与双酚A发生特异性结合，生成分散性较好的双酚A-双酚A适配体-纳米金复合物，其稳定存在于Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液中，溶液颜色由紫色变为红色，导致520nm处共振散射峰线性降低。据此可建立测定双酚A的适配体-纳米金共振瑞利散射光谱法。本测定方法的仪器简单，操作快速，灵敏度高、选择性好。

主权项

一种适配体‑纳米金共振瑞利散射光谱测定塑料制品双酚A的方法，包括如下步骤：（1）制备纳米金‑双酚A适配体探针：取序列为5’‑GGGCCGTTCGAACACGAGCATG‑N60‑GGACAGTACTCAGGTCATCCTAGG‑3’的双酚A适配体，用二次蒸馏水溶解至浓度为100 μmol/L，临用时逐级稀释至0.5 μmol/L 的双酚A适配体于试管中，加入4.0 mL 47.3 μg/mL纳米金溶液，滴加100 µL 0.1 mol/L K2CO3溶液，再缓慢滴加2.0 mL 0.5 μmol/L的双酚A适配体，继续搅拌10 min，于4℃保存，以纳米金计算其浓度为31.0 μg/mL；（2）制备双酚A标准溶液体系：取5支5 mL刻度试管，依次移取250 μL 31.0 μg/mL纳米金‑双酚A适配体探针，5μL、20μL、50μL、100μL、150μL 10μg/mL 双酚A标准溶液，200μL pH 7.6的Na2HPO4‑NaH2PO4缓冲溶液，置于超声波仪上超声10 min，用二次蒸馏水定容至1.5 mL，混匀； （3）制备空白对照溶液体系：用步骤（2）的方法不加双酚A标准液制备空白对照溶液体系；（4）分别取按步骤（2）、(3）制备的双酚A标准溶液体系及空白对照溶液体系适量，置于比色皿中，在荧光分光光度计上，同步扫描激发波长λex和发射波长λem，即λex＝λem，得到体系的共振瑞利散射光谱，测定520 nm波长处双酚A标准溶液体系的共振瑞利散射峰强度值I，并测定其空白对照溶液体系的共振瑞利散射峰强度值I0，计算ΔI = I0‑I；（5）以ΔI对双酚A的浓度关系做工作曲线；（6）被测物样品测定：取含有双酚A的被测物，然后移取一定量替换双酚A标准溶液，按步骤（2）～（4）操作，算出被测物的ΔI样＝I0‑I样；（7）根据样品测得的ΔI样，查步骤（5）的工作曲线，计算出被测物中双酚A的浓度。