[发明专利]一种检测土壤中痕量井冈霉素A的方法

摘要

本发明公开了一种属于土壤中农药残留分析领域的利用大孔强酸性阳离子交换树脂和非极性大孔树脂检测土壤中痕量井冈霉素A的方法。该方法采用缓冲溶液提取土壤中的井冈霉素A，以大孔强酸性阳离子交换树脂D072吸附井冈霉素A，然后以缓冲溶液和乙醇除杂，再利用非极性大孔吸附树脂除去非极性杂质后采用常规反相柱进行痕量井冈霉素A的等度洗脱分析，从而实现对土壤中痕量井冈霉素A的检测。本发明方法分别采用价格便宜的D072树脂和X-5为吸附和净化材料，不仅操作简单，避免了有毒有机溶剂的反复萃取和昂贵的一次性固相萃取小柱的样品净化，也不需要液质联用仪器便可以在普通的反相液相色谱柱上实现井冈霉素A的等度洗脱，既节约了成本，又避免了梯度洗脱造成的基线漂移。准确度高，回收率在70.35%~96.44%之间，精密度好，5次平行测定的相对标准偏差为7.1%~9.8%，最低检限为0.01mg/kg。

主权项

本发明提供了一种检测土壤中痕量井冈霉素A的方法，具体操作步骤如下：(1) 提取：称取40.0 g含有0.05~1.00 mg/kg井冈霉素的土壤样品，以40 mL缓冲溶液超声提取15 min 后，经过布氏漏斗减压抽滤或离心15 min，再分别用30 mL、30 mL缓冲液洗涤残渣、抽滤瓶或离心管，合并清液，用盐酸或氢氧化钠调节提取液的pH值；(2) 富集：量取30 mL经过预处理的阳离子交换树脂于玻璃层析柱中，以60 mL pH 3.5的磷酸盐缓冲液平衡后，将提取液上样于层析柱中进行吸附富集；(3) 去杂：分别用pH 3.5的磷酸盐缓冲溶液和乙醇淋洗去除杂质；(4) 洗脱：用60~175 mL 洗脱剂进行洗脱；(5) 净化：将步骤(4)的洗脱液以不高于60℃的温度，在旋转蒸发仪上浓缩至约30 mL，加入10 g 左右非极性大孔吸附树脂振摇，过滤，用20 mL pH 7.0的磷酸盐缓冲液洗涤树脂2次，过滤，合并滤液，在60℃下旋蒸近干，再用氮气或空气吹干，定量加入2.00 mL pH7.0的 Na2HPO4‑KH2PO4缓冲溶液超声溶解；(6) 检测：将样品溶液按下述色谱操作条件进行检测：LC‑10Atvp型高效液相色谱仪，色谱柱：Aligent C18 plus柱，流动相：甲醇：pH7.0的Na2HPO4‑KH2PO4缓冲溶液体积比2：98，流速：0.6 mL/min，检测波长：210 nm，柱温：35℃，进样量：20 μL；(7) 回收：将使用过的阳离子交换树脂和非极性树脂经过5％HCl和5％NaOH处理后回收再利用。