[发明专利]一种贻贝蒸煮液中多糖类化合物的提纯方法

摘要

本发明涉及一种贻贝蒸煮液中多糖类化合物的提纯方法，其属于水产品深加工技术领域。它解决了贻贝蒸煮液利用率较低而造成原料浪费的不足，其主要包括如下步骤：蛋白脱除——醇沉——脱色——离子交换柱纯化分级——凝胶柱层析——浓缩冻干。本发明充分利用来源丰富、且未得到有效利用的贻贝加工下脚料——蒸煮液，具有提取率高、无污染、过程易控制等特点；通过脱蛋白、脱色、层析纯化等操作提取得到多糖类化合物，有效提高了产品的品质和原材料的利用率。

主权项

一种贻贝蒸煮液中多糖类化合物的提纯方法，其特征在于包括如下步骤：A、蛋白脱除，采用酶解法与Sevag法联用来脱除原料液中的粗蛋白；酶解法：PH值为7.1，枯草杆菌中性蛋白酶加入量为0.52%（v/w），温度为41℃，氯化钙加入量为0.74%（w/w），酶反应时间为3h；Sevag法：氯仿与正丁醇的比例为5:1（v/v），料液比为4:1（w/v）,振摇时间为20min，经过三次脱蛋白处理；B、醇沉，脱蛋白后的样品中加入乙醇使最终溶液中乙醇浓度达到80%；C、脱色，用活性炭脱色，最佳条件为：温度50℃，pH值为3.0，时间为20min，粉末活性炭用量1%（w/v）；D、离子交换柱纯化分级，贻贝多糖DEAE——纤维素离子交换柱纯化分级，始缓冲液为20mmol/L磷酸盐缓冲液，PH值为6.8，洗脱剂为0～2.0mol/L NaCl的缓冲液，温度为室温；先用PH值为6.8，20mmol/L磷酸盐缓冲液洗脱，利用自动部分收集器收集，苯酚——硫酸法跟踪检测收集液的OD490，洗至收集液中无多糖成分检出，并收集所得峰组分；再用0～2.0mol/L NaCl的缓冲液洗脱，利用自动部分收集器收集，苯酚——硫酸法跟踪检测收集液的OD490，并收集所得峰组分。E、凝胶柱层析，SephroseCL‑6B凝胶柱纯化分级时，起始缓冲液为20mmol/L磷酸盐缓冲液，pH值为6.8，洗脱剂为20mmol／L磷酸盐缓冲液，pH值为6.8；温度为室温；用pH值为6.8，20mmol／L磷酸盐缓冲液洗脱，利用自动部分收集器收集，苯酚——硫酸法跟踪检测收集液的OD490，并收集所得峰组分。F、浓缩冻干，即得多糖类化合物成品。