[发明专利]花曲柳悬浮培养体系的建立方法无效
| 申请号： | 201310111904.7 | 申请日： | 2013-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN104094840A | 公开（公告）日： | 2014-10-15 |
| 发明（设计）人： | 詹亚光;刘孚婧;齐凤慧;尹静;曾凡锁;范桂枝 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学;詹亚光;刘孚婧 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明属于细胞工程技术领域。具体涉及一种花曲柳(Fraxinus rhynchophylla Hance.)愈伤组织团块悬浮培养体系的建立方法。本发明以优良花曲柳茎段和叶片作为原始材料，在添加了激素NAA和TDZ的WPM固体培养基上诱导出愈伤组织，将愈伤组织接种到添加了激素NAA和TDZ的WPM液体培养基中，光照振荡培养。经过多代定向诱导驯化，建立了生长量稳定，增殖迅速，团块均匀的愈伤组织团块悬浮系。本发明具有方法简单易行，操作性强，增殖系数可观，能够促进花曲柳的快速繁殖的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 花曲柳 悬浮 培养 体系 建立 方法 | ||
【主权项】：
一种花曲柳(Fraxinus rhynchophylla Hance.)愈伤组织团块悬浮体系建立的方法，其特征在于它包括如下步骤： （1）外植体制备 材料消毒：在超净工作台上将取下的花曲柳茎段和叶片在75%酒精浸泡25‑30s，无菌水冲洗2次，每次5分钟，置入饱和Ca(ClO)2水溶液处理8‑12min，用无菌水冲洗4‑6次，每次5分钟，无菌滤纸上吸干； （2）愈伤组织诱导 将（1）处理好的花曲柳茎段(或叶片)切割成0.5‑1cm(或cm2)左右的小段(或块)，接入诱导愈伤组织培养基中诱导愈伤组织； （3）悬浮培养体系建立 将（2）获得的愈伤组织切割成0.5‑1cm3，接种到适合悬浮细胞生长的液体培养基中，置于转速为110‑140r/min的摇床上，温度23‑26℃，每天光照16h，培养7‑14d继代一次。
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