[发明专利]一种小花蜘蛛抱蛋组织培养快速繁殖方法

摘要

一种小花蜘蛛抱蛋的组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：（1）取小花蜘蛛抱蛋侧芽作为外植体进行消毒；（2）将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到丛生芽；（3）将所述丛生芽置于MS壮苗培养基中进行壮苗培养得到健壮植株；（4）将所述健壮植株置于MS生根培养基中培养得到完整的带根苗；（5）取完整的带根苗进行炼苗后移植于沙土壤生长一个半月，再移栽至大田。采用本发明所述方法得到的种苗健壮、成活率高，可在短期内提供大量小花蜘蛛抱蛋的优质种苗，有效解决了蜘蛛抱蛋的规模化育苗问题。

主权项

一种小花蜘蛛抱蛋组织培养快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：（1）外植体的选择与消毒：取小花蜘蛛抱蛋侧芽作为外植体，依次用2%洗洁精水溶液浸泡5‑15min、线状自来水冲洗10‑20min、添加了2‑3滴吐温‑20的100毫升0.1%升汞消毒8‑10min、无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸吸去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水，（2）侧芽分化获得丛生芽快速繁殖培养：将步骤（1）得到的外植体接种到MS培养基中，在培养温度为23‑26°C，光照强度1400‑2000lux，光照时间为10‑12小时/天的条件下培养30天，侧芽分化后获得丛生芽，其中MS培养基中含0.1‑0.4mg/L的KT、1.0‑2.0mg/L的6‑BA、1.0‑2.0mg/L的NAA、25‑30g/L蔗糖和3.8‑4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，（3）丛生芽壮苗培养：将步骤（2）中得到的试管苗丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23‑26°C，光照强度1400‑2000lux，光照时间为10‑12小时/天的条件下培养40天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中含0.5‑1.5mg/L的6‑BA、0.2‑0.6mg/L的IAA、25‑30g/L蔗糖和3.8‑4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，（4）健壮植株生根培养：将步骤（3）中得到的健壮植株置于MS生根培养基中，在培养温度23‑26°C，光照强度1400‑2000lux，光照时间为10‑12小时/天的条件下培养40天得到带根的完整植株，其中MS生根培养基中含0.5‑1.5mg/L的IAA、1.0‑2.0mg/L的IBA、25‑30g/L蔗糖和3.8‑4.8g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，（5）炼苗与移栽：步骤（4）获得带根的完整植株后，在室温为25°C的室内打开瓶盖，在瓶中加入少量自来水，炼苗2‑4天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，立即移栽到通风良好且弱光沙土壤中，在沙土壤中生长一个半月后移栽大田。