[发明专利]一种利用芋头茎尖进行组织培养的快繁方法

摘要

本发明公开了一种利用芋头茎尖进行组织培养的快繁方法，属于生物技术领域。选取无病菌的芋茎尖为外植体，经过芽的诱导、继代增殖、生根培养等一系列操作步骤，最后形成完整的试管苗。此方法包括上述各阶段培养基成分以及诱导培养的处理方法，本发明利用芋茎尖初代培养20天左右即可长成两片或两片叶片以上的幼苗，大大提高了初代培养的进程，继代培养一次增殖系数平均达到4.3，一般可连续继代5次，培养1470（4.35）株苗，一年可以培养2批，形成组培种芋2940株，有利于芋大规模商品化生产；此方法也有易于获得遗传稳定性好变异率低的再生植株。

主权项

一种利用芋头茎尖进行组织培养的快繁方法，包括以下步骤： （1）外植体的准备：选取保存完好，无腐烂斑点的芋，经质量比0.2%的K2MnO4消毒5min，用沙子覆盖到整个芋块的2/3处，放置到光照培养箱中待其萌发；（2）外植体的灭菌：当芽生长到1‑3cm时切取茎尖，剥除茎尖外层2‑3层叶片，流动水冲洗10min，在超净台上用75%酒精浸泡30s，用84消毒液灭菌10‑15min，无菌水漂洗5‑7次；（3）芽的诱导分化：外植体经灭菌后接种在添加TDZ浓度为0.5mg/L的基本培养基中，20d即长成两片或两片叶片以上的幼苗；（4）继代增殖：诱导培养基上萌发出的不定芽长到2.0cm的时候，接种在添加TDZ浓度为1.0mg/L的基本培养基中，一般连续继代3‑5次；（5）生根培养：将高2.0 cm以上、带有2片叶的健壮小苗切下，转入生根培养基上进行培养，生根培养基成分为1/2MS+琼脂7g/L+蔗糖30g/L+活性炭0.2g/L +6‑BA 0.1mg/L+NAA 0.5mg/L；上述步骤培养条件：培养室温度为25±2℃，光照强度1200‑1500lx，每天光照12h，基本培养基为MS中添加琼脂7g/L，蔗糖30g/L。