[发明专利]从脐带中分离培养间充质干细胞的高效方法有效
申请号: | 201310020489.4 | 申请日: | 2013-01-21 |
公开(公告)号: | CN103266081A | 公开(公告)日: | 2013-08-28 |
发明(设计)人: | 陈虎;张斌;陈晓颖;盛宏霞;徐曼 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院附属医院;铂生卓越生物科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 程泳 |
地址: | 100071*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种从脐带分离培养间充质干细胞的方法,即阶段性植块悬液培养法,其包括以下的步骤:(1)将离体的脐带用组织消化酶进行消化;(2)将消化后得到的细胞用间充质干细胞培养基进行培养,得到间充质干细胞;(3)将消化后得到的未完全消化的组织用间充质干细胞培养基培养,得到间充质干细胞。根据本发明方法获得的间充质干细胞,其在表面标志、生长特点和多向诱导分化等方面均符合间充质干细胞的特性,且方法简便快捷,能同时获得大量间充质干细胞,为间充质干细胞的获得提供了新的途径。 | ||
搜索关键词: | 脐带 分离 培养 间充质 干细胞 高效 方法 | ||
【主权项】:
一种分离培养间充质干细胞的方法,其包括以下的步骤(1),以及步骤(2)和步骤(3)中的一项或两项:(1)取离体的脐带用组织消化酶进行消化处理;优选地,在消化处理前还包括将脐带分割成小段脐带组织块的步骤;(2)在步骤(1)的消化处理结束后,取细胞悬液置于间充质干细胞培养基中培养,得到间充质干细胞;优选地,在培养过程中,将换液时所换下的细胞悬液重置于新培养瓶中继续培养,得到间充质干细胞;优选地,在将步骤(1)处理后得到的细胞悬液置于间充质干细胞培养基前还包括将细胞悬液离心的步骤,将离心后得到的细胞沉淀置于间充质干细胞培养基中培养;任选地,在得到间充质干细胞后,还包括将细胞消化传代的步骤;(3)在步骤(1)的消化处理结束后,取未完全消化的脐带组织置于间充质干细胞培养基中培养,即可得到间充质干细胞;任选地,在得到间充质干细胞后,剩余的脐带组织通过多次重复本步骤中的方法,可多次得到间充质干细胞;任选地,在得到间充质干细胞后,还包括将细胞消化传代的步骤。
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