[发明专利]利用转基因动物乳腺生物平台大规模生产重组人丁酰胆碱酯酶的方法

摘要

本发明提供了利用转基因动物乳腺生物平台大规模生产重组人丁酰胆碱酯酶的方法。本发明首次利用转基因哺乳动物乳腺生物平台大规模高效生产重组人丁酰胆碱酯酶全酶和单体，即不含丁酰胆碱酯酶全酶最后40个氨基酸残基的截断型酶，及丁酰胆碱酯酶单体‑白蛋白融合蛋白。所生产的重组蛋白可用于预防和治疗神经毒气中毒，有机磷农药中毒，可卡因中毒和琥珀胆碱引起的呼吸暂停，及用于检测和祛除蔬菜瓜果和其他农作物、各种物件层面及土壤的有机磷农药残留。

主权项

一种表达盒，其特征在于，所述表达盒从5'至3'，依次包括可操作性连接的以下元件：(i)绝缘体片段；(ii)酪蛋白启动子或乳清酸性蛋白质启动子序列；(iii)至少一个信号肽编码序列，所述信号肽编码序列提供表达丁酰胆碱酯酶单体，或丁酰胆碱酯酶单体‑白蛋白融合蛋白分泌的信号肽；(iv)重组蛋白编码序列，所述编码序列编码丁酰胆碱酯酶单体，或丁酰胆碱酯酶单体‑白蛋白融合蛋白，其中所述丁酰胆碱酯酶单体为不形成四聚体的截断型单体，并且所述的丁酰胆碱酯酶或其融合蛋白选自下组：(a)氨基酸序列如SEQ ID No.:2所示的重组人丁酰胆碱酯酶单体；(b)氨基酸序列如SEQ ID No.:3所示的重组人丁酰胆碱酯酶单体‑白蛋白融合蛋白；和(v)终止密码子；并且，当所述表达盒整合入哺乳动物细胞后，经核移植使转基因哺乳动物乳腺表达并分泌丁酰胆碱酯酶单体，或丁酰胆碱酯酶单体‑白蛋白融合蛋白。