[发明专利]一种复方a 酮酸片中赖氨酸的含量检测方法

摘要

本发明涉及一种复方a酮酸片中赖氨酸的含量检测方法，首先，配制浓度为10mg/ml的邻苯二甲醛反应液（OPA试剂），其中含2%~3%（v/v）的3-巯基丙酸；然后，以自动柱前衍生的方法，在pH为10.2±0.1的硼酸缓冲液系统中将赖氨酸与反应液以约1:1（v/v）的比例混合，室温反应；最后，采用高效液相色谱法在338nm处测定赖氨酸的含量。利用本发明的方法检测赖氨酸的含量，有效的解决了在已有OPA柱前衍生方法中赖氨酸出现的双峰问题，提高了赖氨酸在自动柱前衍生测定中的进样精密度，并且大大缩短了检测时间，特别适合实验室测定氨基酸样品中赖氨酸的含量。

主权项

一种复方a酮酸片中赖氨酸的含量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）硼酸缓冲溶液的配制0.4mol／L硼酸缓冲溶液的配制：取硼酸和氢氧化钠，加水使溶解并稀释制，然后用碱溶液调pH至10.10~10.30；（2）邻苯二甲醛反应液的配制：称取邻苯二甲醛适量，加甲醇或乙醇溶解定容，配制成100mg/ml的邻苯二甲醛储备液；吸取邻苯二甲醛储备液适量，加入2%~3%（v/v）的3‑巯基丙酸混合均匀后用硼酸缓冲液稀释，配制成邻苯二甲醛浓度为10mg/ml的反应液；（3）样品溶液的测定：在可使用自动柱前衍生的高效液相色谱仪下，按如下进样程序对赖氨酸样品进行柱前衍生，并在338nm处对衍生物进行测定：a：200μL/min的速度吸取硼酸缓冲液2.5μL；b：200μL/min速度吸取赖氨酸样品液1μL；c：在空气中以最大速度将硼酸缓冲液和赖氨酸样品液进行混合得第一混合液；d：等待0.2min；e：90μL/min的速度吸取纯化水进行洗针；f：最大速度吸取OPA反应液0.5~2μL；g：在空气中以最大速度将第一混合液和OPA反应液混合；h：进样。