[发明专利]一种简化的可对放流中国对虾实现精确追溯的放流方法

摘要

一种可对放流中国对虾实现精确追溯的放流方法，包括以下步骤：每年放流季节，海捕野生交尾雌虾，并进行眼柄标记，然后进行苗种培育。生产完成的雌虾-75℃超低温冰箱保存备用；秋季，在各放流洄游点进行放流个体的捕捞取样，样品回捕后通过两组中国对虾荧光标记微卫星四重PCR个体识别技术检测放流个体及数量，最终确定中国对虾的放流效果；本发明仅需对生产放流苗种的中国对虾母本进行样本采集，并利用两组荧光标记微卫星四重PCR对采集的放流样本进行亲子溯源分析，即可实现对放流中国对虾的跟踪识别。避免了现有技术需要大批量制备中国对虾全同胞家系、越冬中国对虾亲体培育、雄虾亲本识别的繁琐操作。

主权项

一种可对放流中国对虾实现精确追溯的放流方法，其特征在于包括以下步骤：每年放流季节，海捕野生交尾雌虾，并眼柄标记，然后进行苗种培育，生产完成的雌虾‑75℃超低温冰箱保存备用；秋季，在各放流洄游点进行放流个体的捕捞取样，样品回捕后通过两组中国对虾荧光标记微卫星四重PCR个体识别技术检测放流个体及数量，最终确定中国对虾的放流效果；所述的两组中国对虾荧光标记微卫星四重PCR个体识别技术，第一组微卫星四重PCR引物组合及序列如下：EN0033正向序列为：5′‑6‑FAM‑CCTTGACACGGCATTGATTGG‑3′，反向序列为：5′‑TACGTTGTGCAAACGCCA AGC‑3′；RS0622正向序列为：5′‑VIC‑TCAGTCCGTAGTTCATACTTGG‑3′，反向序列为：5′‑CACATGCCTTTGTGTGAAAACG‑3′；FCKR002正向序列为：5′‑NED‑CTCAACCCTCACCTCAGGAACA‑3′，反向序列为：5′‑AATTGTGGAGGCGACTAAGTTC‑3′；FCKR013正向序列为：5′‑PET‑GCACATATAAGCACAAACGCTC‑3′，反向序列为：5′‑CTCTCTCGCAATCTCTCCAACT‑3′；所述的两组中国对虾荧光标记微卫星四重PCR个体识别技术，第二组微卫星四重PCR引物组合及序列如下：RS1101正向序列为：5′‑6‑FAM‑CGAGTGGCAGCGAGTCCT‑3′，反向序列为：5′‑TATTCCCACGCTCTTGTC‑3′FCKR005正向序列为:5′‑VIC‑CATCGAATCTAAGAGCTGGAAT‑3′，反向序列为：5′‑TTTGTTTGTGAATAATGTGTGT‑3′FCKR007正向序列为:5′‑NED‑CGAAATAAGTTAAATGAAAAAA‑3′，反向序列为：5′‑CAACATAAGACTCACGAGACAG‑3′FCKR009正向序列为:5′‑PET‑GCACGAAAACACATTAGTAGGA‑3′，反向序列为：5′‑ATATCTGGAATGGCAAAGAGTC‑3′。