[发明专利]广谱促生生防芽孢杆菌B96-II发酵液的制备方法

摘要

本发明是涉及一种生防菌发酵液的制作方法，具体为一种具有防治蔬菜瓜类以枯萎病为主的土传病害及对多种蔬菜有促生效果的广谱促生生防芽孢杆菌B96-II发酵液的制备方法。广谱促生生防芽孢杆菌B96-II发酵液的制备方法，包括如下步骤：菌种活化；制作B96-II种子液培养基；制作B96-II种子液；制作B96-II发酵液体培养基；制作B96-II发酵液。本发明制得的芽孢杆菌B96-II发酵液广谱性好，可防治多种蔬菜瓜类的病害，而且对多种蔬菜有促生效果，可广泛适用于蔬菜瓜类土传病害的防治。

主权项

广谱促生生防芽孢杆菌B96‑II发酵液的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（一）菌种活化：将2‑3代芽孢杆菌B96‑II菌种接入预先制作3‑5天、温度保持在4‑10℃的PDA斜面培养基，在28℃恒温培养箱内培养2‑3天，得到PDA斜面菌种；（二）制作B96‑II种子液培养基：取洗净削皮的马铃薯200g,切1cm方块，1L清水煮沸再温火煮30分钟，过滤后将滤液用蒸馏水定容至1000mL，加入磷酸二氢钾1‑10 g、氯化钠1‑10g、葡萄糖10‑20g混合均匀后装瓶121℃灭菌20‑30分，得到B96‑II种子液培养基；（三）制作B96‑II种子液：待B96‑II种子液培养基自然冷却后，将步骤（一）制得的PDA斜面菌种接入，30‑34℃摇床，150‑180转/分，培养24‑36小时，得到B96‑II种子液；（四）制作B96‑II发酵液体培养基：玉米粉1‑10g、黄豆粉1‑10g、蛋白胨1‑10g、磷酸二氢钾1‑10g、氯化钠1‑15g、硫酸铵1‑15g、碳酸钙0.1‑10g、硫酸镁0.1‑10g、硫酸锌0.1‑10g 、氯化锰0.1‑10g 、酵母膏1‑10g、葡萄糖10‑200g、水1000mL，121℃灭菌20‑40分，得到B96‑II发酵液体培养基；（五）制作B96‑II发酵液：将步骤（三）制得的B96‑II种子液按10‑20%体积浓度接入步骤（四）制得的B96‑II发酵液体培养基中，30‑34℃摇床， 150‑180转/分，培养48小时，得到的菌液即为B96‑II发酵液。