[发明专利]一种红叶石楠体细胞60Co r射线辐射诱变和低温复合处理的方法

摘要

本发明公开了一种红叶石楠体细胞60Co r射线辐射诱变和低温复合处理方法，是将红叶石楠胚性愈伤组织先用60Co r射线辐射处理，然后再置于愈伤组织分化培养基上低温处理，其后暗培养，最后继代到培养基中继续培育至长出红叶石楠组培苗即可移栽至大田种植。本发明建立的方法分化率高达65%，为红叶石楠新品种开发、优质品种的选育奠定了基础。

主权项

一种红叶石楠体细胞60Co r射线辐射诱变和低温复合处理的方法，是将红叶石楠胚性愈伤组织先用60Co r射线辐射处理，然后再置于愈伤组织分化培养基上低温处理，其后暗培养，最后继代到培养基中继续培育至长出红叶石楠组培苗即可移栽至大田种植；其特征在于：所述红叶石楠胚性愈伤组织是指在愈伤组织增殖培养基上暗培养获得的红叶石楠胚性愈伤组织；所述60Co r射线辐射处理的方法是：用60Co r射线辐射处理红叶石楠胚性愈伤组织1‑2小时，辐照剂量为15～45Gy；所述低温处理的方法是：将辐射后的红叶石楠材料转入愈伤组织分化培养基上，在人工气候箱下暗培，温度为5±2℃，处理5‑10d，之后再置于温度为25±2℃条件下暗培养20‑25d；所述红叶石楠组培苗的培育方法是：将暗培养后的红叶石楠材料转移到组培室光照条件下培养，温度为25±2℃，光照为1500LX‑1800LX，光照时间为14‑16h/d，15±2d后分化产生绿芽，绿芽先转到愈伤组织分化培养基上培养20±2d，转移到生根培养基上继续培育，直至得到完整红叶石楠组培苗；其中：上述愈伤组织增殖培养基组成为：改良MS+2，4‑二氯苯氧乙酸（2,4‑D）0.1mg/L+6‑苄基氨基嘌呤（BA）0.5mg/L+萘乙酸（NAA）20.0mg/L+phytagel 3.0g/L+蔗糖20g/L；上述愈伤组织分化培养基组成为：改良MS+6‑苄基氨基嘌呤（BA）2.0mg/L+phytagel3.5g/L+蔗糖20g/L；上述生根培养基组成为：1/2MS+吲哚丁酸（IBA）0.2mg/L；上述各种培养基在高压灭菌前，调整pH值至5.8。