[发明专利]用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法。氧化还原探针由对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物、纳米金溶胶组成。氧化还原探针中的纳米金溶胶与巯基席夫碱配合物有较强的相互作用，能够为无标记CRP阻抗型免疫传感器提供较强的阻抗检测信息号，有效的提高了免疫传感器的检测性能。本发明的氧化还原探针制备简单，用于无标记CRP阻抗型免疫传感器检测CRP含量，具有检测限低、稳定性好和重现性好等优点。

主权项

一种用于无标记CRP阻抗型免疫传感器的氧化还原探针的制备方法，其特征在于具体步骤为：（1）合成对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱： 在搅拌的条件下，向20mL溶有8‑12mmol对苯二甲醛的无水乙醇溶液中,缓慢滴加40mL含8‑12mmol氨基苯硫酚的无水乙醇溶液，60℃水浴加热4小时,得亮黄色沉淀，用乙醇重结晶，真空干燥即得对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱；（2）合成对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物：将无水乙醇和N,N′—二甲基甲酰胺按体积比为2：1配制成混合溶液，在搅拌的条件下，向5mL溶有0.5‑1.5mmol步骤（1）所得的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱的上述混合溶液中,缓慢滴加8mL含1‑3mmol乙酸镍的N,N′—二甲基甲酰胺溶液，75℃水浴加热4小时,得淡绿色沉淀，用乙醇重结晶，真空干燥即得对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物；（3）制备氧化还原探针：   取0.01g‑0.05g步骤（2）所得的对苯二甲醛缩邻氨基苯硫酚席夫碱镍配合物粉末，在室温下搅拌溶于50mL无水乙醇中,取此溶液15‑25μL缓慢加入到7mL‑12mL纳米金溶胶中，在36℃下混合均匀后的溶液即为氧化还原探针。