[发明专利]重组人干扰素-α-2b-BCG的生产方法

摘要

本发明公开了一种重组人干扰素-α-2b-BCG的生产方法，其是将重组干扰素-α-2b-BCG菌种接种于含卡那霉素30微升/毫升的改良的苏通马铃薯液体培养基中，获得一级活化种子液，再按1-4%比例接种至改良的苏通马铃薯液体培养基中，获得OD600A值=2的二级种子液；发酵罐内改良的苏通马铃薯液体培养基高压灭菌后，按2-6%的比例加入二级种子液，发酵运行7-10天，收集发酵液，离心，取沉淀物用PBS洗涤，再次离心收获菌种。这样生产的重组人干扰素-α-2b-BCG单次生产量大，生长过程易检测，培养条件参数可控，根据生长过程调节培养过程中酸碱度、氧气和营养物质的需求，直接收获富集的散在菌体，避免了研磨等容易造成污染的操作。

主权项

一种重组人干扰素‑α‑2b‑BCG的生产方法，其生产步骤是：a.采选重组干扰素‑α‑2b‑BCG菌种并接种于含卡那霉素30微升/毫升的新鲜改良的苏通马铃薯液体培养基中，获得一级活化种子液；b.按体积百分比将1~4%的一级活化种子液接种至改良的苏通马铃薯液体培养基中，震摇培养7~9天获得浓度达标准OD600的 A值=2，得二级种子液；c.发酵罐内最终装料容积比6~7:10改良的苏通马铃薯液体培养基高压灭菌后，按体积百分比在培养基内加入2~6%的二级种子液，发酵运行7~10天，取样涂玻片抗酸染色检测无污染，检测OD600值达2.0以上，收集发酵液；d.发酵液离心，取沉淀物用0.01M磷酸缓冲盐溶液洗涤，再次离心收获菌种。