[发明专利]一种Hib多糖与精制破伤风类毒素偶联工艺

摘要

本发明公开了一种Hib多糖与精制破伤风类毒素偶联工艺，它包括Hib多糖-AH衍生物生成和Hib多糖-TT结合物制备两个步骤，Hib多糖-AH衍生物生成包括以下子步骤：A1、多糖溶解，A2、多糖活化，A3、加入ADH进行连接，A4、去除CNBr和ADH；Hib多糖-TT结合物制备包括以下子步骤：B1、加入TT溶液，B2、加入EDAC，B3、去除EDAC，得到多糖-TT偶联物；B4、将多糖-TT偶联物分离纯化，洗脱，除菌过滤，得到多糖-TT结合物。本发明的有益效果是：提高了工作效率，省工省时，同时，节约了NaCl溶液的用量；本发明与传统工艺采用的透析相比，减少了样品被污染几率。

主权项

一种Hib多糖与精制破伤风类毒素偶联工艺，其特征在于：它包括Hib多糖‑AH衍生物生成和Hib多糖‑TT结合物制备两个步骤，所述的Hib多糖‑AH衍生物生成包括以下子步骤：A1、多糖溶解，称取Hib多糖，加入灭菌后的注射用水，使其终浓度为1～3mg/ml；A2、多糖活化，按0.2～0.6倍Hib多糖的量加入CNBr进行活化，并维持PH为9.5～10.5间反应20～30min；A3、生成，加入2～5倍于Hib多糖量的ADH进行连接，并维持PH在7.5～8.5间反应20～30min；A4、提纯，用30～50KD的膜包，先用0.02～0.05mol/L的NaCl按1:1的体积比进行稀释，然后超滤至1/2体积，反复稀释和超滤10～15次。