[发明专利]小肠结肠耶尔森菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用

摘要

本发明涉及肠道病原菌中耶尔森菌属的小肠结肠耶尔森菌的分离和鉴定方法，主要解决现有小肠结肠耶尔森菌分离方法存在的漏检率高、鉴定步骤繁复且成本较高、筛选结果不够直观的技术难题。试剂盒，包括：1）通用型非选择性增菌液；2）10倍浓缩通用型非选择性增菌液；3）耶尔森菌冷增菌液；4）耶尔森菌快速选择性增菌液；5）选择性分离平板；6）产毒性小肠结肠耶尔森菌显色琼脂平板；7）小肠结肠耶尔森菌生化鉴定管配方；8）硫化氢滤纸条；9）吲哚滤纸条。利用选择性增菌、选择性分离培养基对应生长的典型菌落形态、简易生化和特异性酶-底物反应组合试验筛选、鉴定。

主权项

小肠结肠耶尔森菌分离、鉴定的试剂盒，包括：1）、通用型非选择性增菌液：成分：胰化酪蛋白胨17.0g，植物蛋白胨3.0g，氯化钠5.0g，K2HPO4 2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000ml；2）、10倍浓缩通用型非选择性增菌液：成分：胰化酪蛋白胨17.0g，植物蛋白胨3.0g，氯化钠5.0g，K2HPO4 2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水100ml；3）、耶尔森菌冷增菌液：蛋白胨山梨醇胆盐肉汤：动物组织胰化胨5.0g，山梨醇10.0g，磷酸氢二钠8.23g，磷酸二氢钠1.2g，混合胆盐1.5g，氯化钠5.0g；4）、耶尔森菌快速选择性增菌液：成分：氯化镁60.0g，胰化酪蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，高氯酸1.0g，酵母浸出物1.0g，2%质量百分浓度的孔雀石绿5.0ml，三氯生溶液1.0ml，蒸馏水1000ml，替卡西林1.0ml；5）、选择性分离平板：成分：琼脂12.5g，甘露醇20.0g，胰化酪蛋白胨20.0g，酵母浸出物3.0g，氯化钠1.0g，丙酮酸钠2.0g，去氧胆酸那2.0g，硫酸镁0.01g，蒸馏水950ml，三氯生溶液1ml，中性红10ml，结晶紫10ml，头孢噻吩10ml，新生霉素10ml，氯化锶溶液10ml；6）、产毒性小肠结肠耶尔森菌显色琼脂平板：成分：琼脂15.0g，脑心浸液肉汤干粉25g，植物蛋白胨3.0g.0g，酵母浸出物6.0g，丙酮酸钠2.0g，D‑纤维二糖20g，蒸馏水950ml，5‑溴‑4‑氯‑3‑吲哚‑β‑D‑吡喃半乳糖苷150mg，X‑β‑glc 200mg，三氯生溶液1ml，中性红10ml，结晶紫10ml，头孢磺啶10ml，万古霉素10ml；7）、小肠结肠耶尔森菌生化鉴定管配方：第一管成分：琼脂14g，牛肉膏2g，酵母浸出粉2g，葡萄糖1g，蛋白胨15g，甘露醇10g，尿素10g，0.2%质量百分浓度的麝香草酚蓝溶液10ml，0.2%质量百分浓度的溴麝香草酚蓝溶液12.5ml，0.2%质量百分浓度的甲酚红溶液4ml，蒸馏水1000ml；第二管成分：琼脂3g，胰蛋白胨10g，蛋白胨10g，氯化钠5g，10%质量百分浓度的Na2HPO42.5ml，蔗糖10g，1%质量百分浓度的硫代硫酸钠溶液2.5ml，0.2%质量百分浓度的溴麝香草酚蓝溶液5ml，蒸馏水1000ml；8）、硫化氢滤纸条；9）、吲哚滤纸条。