[发明专利]NOX4敲减的A375稳转细胞株及其构建方法有效
申请号: | 201210256155.2 | 申请日: | 2012-07-24 |
公开(公告)号: | CN102747038A | 公开(公告)日: | 2012-10-24 |
发明(设计)人: | 朱月春;张春华;李波;张正;况应敏 | 申请(专利权)人: | 昆明医科大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867 |
代理公司: | 云南派特律师事务所 53110 | 代理人: | 张怡 |
地址: | 650500 云南省昆明*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明属于医学分子生物学领域。本发明所述的NOX4敲减的A375稳转细胞株是利用逆转录病毒载体pSuper.retro.puro将模板DNA双链中的F链5'-GATCCCCGGGCTAGGATTGTGTCTAAGCTTCAAGAGAGCTTAGACACAATCCTAGCCCTTTTTA-3'和R链5'-AGCTTAAAAAGGGCTAGGATTGTGTCTAAGCTCTCTTGAAGCTTAGACACAATCCTAGCCCGGG-3'插入进A375细胞基因组,经转录后生成的干扰RNA靶向降解A375细胞内源性NOX4mRNA,靶向沉默内源性NOX4表达,进而靶向敲减A375细胞内源性NOX4表达80%以上的稳转细胞株。 | ||
搜索关键词: | nox4 a375 细胞株 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种NOX4敲减的A375稳转细胞株,其特征在于是利用逆转录病毒载体pSuper.retro.puro将模板DNA双链中的F链5'‑GATCCCCGGGCTAGGATTGTGTCTAAGCTTCAAGAGAGCTTAGACACAATCCTA GCCCTTTTTA‑3'和R链5'‑AGCTTAAAAAGGGCTAGGATTGTGTCTAAGCTCTCTTGAAGCTTA GACACAATCCTAGCCCGGG‑3'插入进A375细胞基因组,经转录后生成的干扰RNA靶向降解A375细胞内源性NOX4 mRNA,靶向沉默内源性NOX4表达,进而靶向敲减A375细胞内源性NOX4表达80%以上的稳转细胞株。
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