[发明专利]一种油棕胚性愈伤组织的诱导方法

摘要

本发明属植物组织培养技术领域，涉及一种油棕胚性愈伤组织的诱导方法，是切取油棕母株茎干生长点上的油棕茎段，然后取油棕嫩叶修剪成片样，接种到愈伤组织诱导培养基中进行培养得到愈伤组织；将愈伤组织转接到胚性愈伤组织培养基中进行培养得到胚性愈伤组织。本发明步骤简单，以油棕幼嫩叶片为外植体诱导形成胚性愈伤组织，建立高效的油棕胚性愈伤组织培养体系，提高油棕胚性愈伤组织的产量，有效地解决了油棕胚性愈伤组织诱导困难、诱导率低的问题，为建立油棕组织培养体系、快速繁育油棕组培苗奠定基础，是一条提高油棕组培苗产量的有效途径。

主权项

一种油棕胚性愈伤组织的诱导方法，其特征在于，其步骤如下：1）、外植体的选取选取树龄8～10年的油棕母株，切取茎干生长点上15cm至95cm处的油棕茎段，经表面除杂、清洗后进行消毒处理，然后将晾干后的外植体转入超净工作台，剥除外层的老叶片，得到无菌的油棕嫩叶；2）、愈伤组织的诱导培养将油棕嫩叶修剪至大小为1cm×2cm的片样，接种到愈伤组织诱导培养基中进行培养得到愈伤组织，培养条件：暗培养，培养温度26～30℃，每3个月继代一次；所述愈伤组织诱导培养基是以改良MS培养基为基础培养基，并添加激素和活性炭1～5g/L，pH值为5.0～6.0，所述激素是NAA、2,4‑D或TCPP中的一种、两种或三种，其添加量分别为：NAA 200mg/L以下、2,4‑D 60mg/L以下、TCPP 2mg/L以下；所述改良MS培养基是以MS培养基为基础，在其它成分不变的条件下调整其中的肌醇、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇和烟酸的含量分别为：0.1～5mg/L、0.1～5mg/L、0.1～5mg/L、0.1～5mg/L，并添加精氨酸50～300mg/L、天冬氨酸50～300mg/L、谷氨酸50～300mg/L；3）、胚性愈伤组织的培养将得到的愈伤组织转接到胚性愈伤组织培养基中进行培养得到胚性愈伤组织，培养条件：暗培养，培养温度26～30℃，每3个月继代一次；所述胚性愈伤组织培养基是以改良MS培养基为基础培养基，并添加激素和活性炭1～5g/L，pH值为5.0～6.0，所述激素是NAA或2，4‑D中的一种或两种，其添加量分别为：NAA 140mg/L以下、2，4‑D 20mg/L以下。