[发明专利]一种转化水稻抗病基因并获得无选择标记转基因后代的方法有效
| 申请号： | 201210223328.0 | 申请日： | 2012-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN102703499A | 公开（公告）日： | 2012-10-03 |
| 发明（设计）人： | 瞿绍洪;李军;王歆;赵建华;何海燕;刘中来 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12Q1/68;A01H4/00;A01H5/00 |
| 代理公司： | 杭州九洲专利事务所有限公司 33101 | 代理人： | 鲁秦 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种转化水稻抗病基因并获得无选择标记转基因后代的方法，首先，将绿色荧光蛋白(GFP)与潮霉素磷酸转移酶(HPT)克隆于标记基因载体，目的基因置于另一T-DNA载体，携带标记基因载体的农杆菌菌株与携带目的基因载体的农杆菌菌株混合并转化水稻愈伤组织，利用特异引物对目的基因载体的抗病基因进行PCR检测，筛选获得共转化植株(T0)。然后，在共转化植株的分离世代(T1或T2)，借助于台灯式荧光检测器，大量、快速地筛除GFP阳性的标记基因植株，并对GFP阴性植株进行抗病基因的PCR检测，从而获得转抗病基因的无选择标记个体。本发明可以应用于水稻抗稻瘟病基因或其它功能基因的无选择标记转基因育种，提高水稻抗病能力或改良其它农艺性状。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 转化 水稻 抗病 基因 获得 选择 标记 转基因 后代 方法 | ||
【主权项】：
一种转化水稻抗病基因并获得无选择标记转基因后代的方法，包含以下步骤：1）将绿色荧光蛋白(GFP)与潮霉素磷酸转移酶(HPT)克隆于标记基因载体，目的基因置于另一T‑DNA载体；2）携带标记基因载体的农杆菌菌株与携带目的基因载体的农杆菌菌株混合并转化水稻愈伤组织；3）利用特异引物对目的基因载体的抗病基因进行PCR检测，筛选获得共转化植株(T0)；4）在共转化植株的分离世代(T1或T2)，借助于台灯式荧光检测器，筛除GFP阳性的标记基因植株，并对GFP阴性植株进行抗病基因的PCR检测，从而获得转抗病基因的无选择标记个体。
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