[发明专利]一种质粒型腺病毒载体pAd-PPARGC1A及其构建方法在审

专利信息
申请号: 201210210385.5 申请日: 2012-06-25
公开(公告)号: CN102766653A 公开(公告)日: 2012-11-07
发明(设计)人: 陈宏;李密杰;刘栋;蓝贤勇;雷初朝 申请(专利权)人: 西北农林科技大学
主分类号: C12N15/861 分类号: C12N15/861;C12N15/66
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 712100 *** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 发明一种质粒型腺病毒载体pAd-PPARGC1A及其构建方法,属于基因工程技术领域。构建方法是将秦川牛PPARGC1A基因插入pAdTrack-CMV穿梭质粒的CMV启动子之下,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-PPARGC1A。Pme I线性化后转化含有pAdEasy-l腺病毒骨架质粒的E.coli BJ5183感受态细菌,利用E.coli BJ5183内源Cre重组酶的高效同源重组系统,在细菌中完成pAdTrack-CMV-PPARGC1A与pAdEasy-1的同源重组。将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-PPARGC1A。pAd-PPARGC1A经Pac I线性化后暴露反向的末端重复序列,脂质体转染HEK-293A细胞后产生重组病毒颗粒。本发明具有保证重组腺病毒载体的生物安全性、促进该基因的高效表达和利于后续检测该基因的表达的优点。
搜索关键词: 一种 质粒 病毒 载体 pad ppargc1a 及其 构建 方法
【主权项】:
一种质粒型腺病毒载体pAd‑PPARGC1A,其特征在于:所述质粒型腺病毒载体pAd‑PPARGC1A含有如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的秦川牛PPARGC1A基因。
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