[发明专利]一种重组胰岛素样生长因子-I的制备方法有效
申请号: | 201210206263.9 | 申请日: | 2012-06-20 |
公开(公告)号: | CN102732549A | 公开(公告)日: | 2012-10-17 |
发明(设计)人: | 王惠生;肖齐世;刘振青;任洪柳;周项 | 申请(专利权)人: | 上海普欣生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C07K14/65;C07K1/36;C07K1/22;C07K1/20;C07K1/18 |
代理公司: | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人: | 许亦琳;余明伟 |
地址: | 200437 上海市杨*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组胰岛素样生长因子-I的制备方法,先将5’端引入烟草蚀纹病毒蛋白酶识别序列编码基因的胰岛素样生长因子-I的编码基因克隆入原核表达载体,构建成重组原核表达载体;而后将重组原核表达载体转入合适的原核宿主细胞;而后培养原核宿主细胞,表达可溶性含胰岛素样生长因子-I的融合蛋白;最后分离出含胰岛素样生长因子-I的融合蛋白,用烟草蚀纹病毒蛋白酶酶解后,再分离获得重组胰岛素样生长因子-I。本发明制备IGF-I的方法与现有化学裂解法或酵母系统生产相比,表达量高,成本低,有利于大规模生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 胰岛素 生长因子 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种重组胰岛素样生长因子‑I的制备方法包括下列步骤:1)将5’端引入烟草蚀纹病毒蛋白酶识别序列编码基因的重组胰岛素样生长因子‑I的编码基因克隆入原核表达载体,构建成重组原核表达载体;2)将步骤1构建的重组原核表达载体转入合适的原核宿主细胞;3)培养步骤2的原核宿主细胞,使其表达可溶性含胰岛素样生长因子‑I的融合蛋白;4)分离出含胰岛素样生长因子‑I的融合蛋白,用烟草蚀纹病毒蛋白酶酶解后,再分离获得重组胰岛素样生长因子‑I。
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