[发明专利]应用篮式生物反应器制备人二倍体细胞风疹减毒活疫苗的方法

摘要

本发明提供了一种应用篮式生物反应器制备人二倍体细胞风疹减毒活疫苗的方法，该方法包括步骤：在篮式生物反应器中加入DMEM培养基，接种人二倍体细胞培养，细胞接种密度0.5×106～2.0×106cells/ml；培养条件：搅拌转速90～150rpm，DO 55％，pH7.0～7.4，37±1℃；培养至第6～9天时进行病毒接种，接种MOI为0.02～0.08，30±1℃培养；病毒接种22～26小时后，用PBS洗换，注入含0.2～0.3w/v％人血白蛋白的DMEM病毒维持液维持培养至收获病毒液。利用本发明的技术制备以人二倍体细胞为基质的风疹减毒活疫苗，减少了交叉污染，制品质量均一，具有较高经济效益。

主权项

一种应用篮式生物反应器制备人二倍体细胞风疹减毒活疫苗的方法，该方法包括步骤：在篮式生物反应器中加入DMEM培养基作为生长液，接种人二倍体细胞进行培养，细胞接种密度为：0.5×106～2.0×106cells/ml；培养条件：搅拌转速90～150rpm，溶氧55％，pH7.0～7.4，温度37±1℃；在人二倍体细胞培养至第6～9天时，进行风疹病毒的接种，病毒接种MOI为0.02～0.08，毒种病毒滴度5.0～5.5lgCCID50/ml，病毒培养温度30±1℃；病毒接种22～26小时后，应用pH值为7.1～7.2的PBS进行洗换，洗换结束后注入含0.2～0.3w/v％人血白蛋白的DMEM病毒维持液继续培养，至收获病毒液。