[发明专利]利用固定化酶从花生饼粕中生产活性肽的方法

摘要

本发明属于花生蛋白深加工技术领域，具体涉及一种利用固定化酶从花生饼粕中生产活性肽的方法，具体为：采用化学改性的磁性壳聚糖微粒固定碱性和中性两种蛋白酶，以此进行酶法水解，离心、脱色、纳滤脱盐、超滤分级、喷雾干燥获得花生活性肽。较传统制备方法，该方法具有生产成本低、生产周期短、产品得率高、纯度高、生产工艺具有温和、绿色、节能等特点。采用本发明方法生产出的花生功能肽除了具有良好的溶解性外，还具有降血压和抗氧化功能，因此具有广阔的市场开发价值。

主权项

一种利用固定化酶从花生饼粕中生产活性肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）制备化学改性的磁性壳聚糖微粒：在碱性条件下，将壳聚糖粉末与环氧氯丙烷混合后于50－100℃搅拌反应1‑2 h，然后加入二胺化合物继续反应1.5‑2.5 h，反应结束后固液分离，取固体备用，投料比按照每1g壳聚糖粉末添加3‑5ml环氧氯丙烷和1‑5ml二胺化合物计；将固体用稀酸溶解后，加入三聚磷酸钠和粒径≤100nm、纯度不小于95%的四氧化三铁超声波搅拌处理，三聚磷酸钠的加入量为固体重量的0.05‑0.1倍，四氧化三铁的加入量为固体重量的0.25‑0.75倍，反应完毕后用磁铁吸附体系中的固体颗粒，即为改性后的磁性壳聚糖微粒，记为固体颗粒a；2）磁性壳聚糖固定复合蛋白酶：将上述改性后的磁性壳聚糖微粒加入到含2‑5V%戊二醛的磷酸缓冲液中室温下搅拌1‑3 h，然后加入含复合蛋白酶的磷酸缓冲液继续搅拌3‑6 h，结束后用磁铁将体系中的固体颗粒吸附出，记为固体颗粒b，备用；其中，所述磷酸缓冲液浓度为0.05－0.2 mol/L，pH 6.8‑8.0；投料比按照每1g改性后的磁性壳聚糖微粒添加10‑30mL含戊二醛的磷酸缓冲液和2‑6 mL含复合蛋白酶的磷酸缓冲液计，复合蛋白酶在体系中的质量终浓度为0.1‑2.5%；3）制备花生蛋白：将花生饼粕粉碎、脱油后，采用碱提酸沉提取花生蛋白；4）制备花生活性肽：将花生蛋白用蒸馏水溶解并调至pH为 8.0－10.5，然后加入固体颗粒b于35－50 ℃酶解2－4h，酶用量为3000－4000 u/g蛋白，反应结束后调至酶解反应体系pH为7.0；5）肽液纯化处理：取步骤4）所得酶解反应体系，将除去固体颗粒后的剩余溶液离心，取上清液用活性炭吸附脱色、纳滤膜脱盐、超滤膜分离得花生活性肽精制液，花生肽精制液再经浓缩、喷雾干燥制得花生活性肽干粉。