[发明专利]一种小动物肝脏特异性基因转染方法以及以其为基础的转基因小动物模型的构建方法

摘要

本发明公开了一种以眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法为基础的小动物肝脏特异性基因转染方法。该方法将眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法巧妙地结合在一起，通过该方法可以使外源基因特异性地在动物肝脏中表达，且其对肝脏组织所造成的损伤作用是短暂的、有限的。通过转染可表达不同目的蛋白的外源基因，该技术可以用于多种动物模型的建立和基因治疗的效果评价。用本发明的方法可以评价不同外源基因在实验动物体内表达所引起的生物学反应，也可作为建立动物模型的一种手段，可广泛应用于各个门类的生物医学动物实验当中，应用前景广阔。

主权项

一种构建转基因小动物模型的方法，包括下述步骤：1)构建携带目的基因的重组表达质粒，所述目的基因为肝脏特异性基因HBV或HCV全基因组基因；2)以眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法为基础的小动物肝脏特异性基因转染方法将所述携带目的基因的重组表达质粒转染到小动物体内，得到转基因小动物模型；所述以眼底静脉丛注射技术和静脉高压注射转染法为基础的小动物肝脏特异性基因转染方法，是将大于1μg携带目的基因的重组表达质粒溶解于相当于实验动物体重4‑10％的生理盐水，以8秒的速度注射入实验动物的眼底静脉丛内，8‑36小时后目的基因在实验动物肝脏处获得表达；所述小动物为新生鼠或树鼩。