[发明专利]一种以叶原基为外植体的金钱松愈伤组织培养方法无效
| 申请号： | 201210104866.8 | 申请日： | 2012-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN102599064A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 王跃华;杨小萍;袁畅;孙雁霞;黄兴;王丹;王强;蔡锐;刘洪明;李红梅;王杰;唐旭 | 申请（专利权）人： | 成都大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 成都科奥专利事务所(普通合伙) 51101 | 代理人： | 王蔚 |
| 地址： | 610106*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种以叶原基为外植体的金钱松愈伤组织培养方法，该方法是先将金钱松的芽进行消毒处理，再切取消毒后的芽上的叶原基作为外植体接入愈伤组织诱导培养基MS+6-BA 1.0～2.0mg·L-1+NAA 0.1～1.0mg·L-1+IAA 0.1～0.5mg·L-1+蔗糖20～50g·L-1+琼脂5.0～7.0g·L-1和增殖培养基MS+6-BA 0.5～1.0mg·L-1+NAA 0.1～1.0mg·L-1+蔗糖20～50g·L-1+琼脂5.0～7.0g·L-1或MS+6-BA 0.5～1.0mg·L-1+IAA 0.1～1.0mg·L-1+蔗糖20～50g·L-1+琼脂5.0～7.0g·L-1中进行培养，最终实现了对金钱松植物愈伤组织的有效诱导和快速增殖。本发明有效地解决了当前金钱松药材资源短缺的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 原基 外植体 金钱松 组织培养 方法 | ||
【主权项】：
一种以叶原基为外植体的金钱松愈伤组织培养方法，其特征在于包括如下步骤：(1)材料的选取和消毒：选取落叶后生长健康、无病虫害的金钱松植株上的芽，剥去芽上的芽鳞片后将芽放在超净工作台上，先用浓度为70％的酒精消毒10～50s，再用浓度为0.1％～0.15％的升汞消毒3～25min，最后用无菌水冲洗2～5次后用已灭菌的滤纸吸干水分；(2)愈伤组织的诱导培养：取已消毒的芽，切取芽上的叶原基作为外植体接入愈伤组织诱导培养基MS+6‑BA 1.0～2.0mg·L‑1+NAA 0.1～1.0mg·L‑1+IAA 0.1～0.5mg·L‑1+蔗糖20～50g·L‑1+琼脂5.0～7.0g·L‑1中进行培养，pH值为5.6～6.5，培养温度5～30℃、每天光照0～24小时、光照强度为1000～2000lx；(3)愈伤组织的增殖培养：选取无褐变、颜色为翠绿色、质地较紧密的愈伤组织，将其切成大小为3～8mm3的团块后转接入愈伤组织增殖培养基MS+6‑BA 0.5～1.0mg·L‑1+NAA 0.1～1.0mg·L‑1+蔗糖20～50g·L‑1+琼脂5.0～7.0g·L‑1或MS+6‑BA 0.5～1.0mg·L‑1+IAA 0.1～1.0mg·L‑1+蔗糖20～50g·L‑1+琼脂5.0～7.0g·L‑1中进行培养，pH值为5.6～6.5，培养温度5～30℃、每天光照0～24小时、光照强度为1000～2000lx。
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