[发明专利]一种同时检测玉米和花生中四种真菌毒素的悬浮芯片检测方法

摘要

本发明公开一种同时检测多种真菌毒素(黄曲霉毒素B1、呕l吐毒素、T-2毒素、玉米赤霉烯酮)的悬浮芯片检测技术。将各毒素完全抗原与不同编码的羧基化微球通过EDC法进行偶联，使其共价结合。采用竞争法进行悬浮芯片技术研究，即检测时将偶联物、多种毒素的单抗先振荡，后加各标准品使相应的待测物小分子与完全抗原竞争有限的单抗，离心弃上清后加生物素化二抗，再离心弃上清后加SA-PE，形成待测物抗原-单抗-二抗-SA-PE的复合物，中位荧光值随小分子浓度的增加而减小，从而绘制多通道的竞争标准曲线。用一定比例的甲醇/水对玉米和花生进行前处理，以阴性处理液为稀释液分别绘制出玉米和花生中的多通道标准曲线，通过研究基质效应、方法的准确性和重复性，实现悬浮芯片法同时检测玉米和花生中多种真菌毒素的目的。该技术灵敏度达pg～ng级，结果稳定可靠，样品用量少，简便、快速，为多种毒素的检测提供新方法。

主权项

一种多真菌毒素定量检测的悬浮芯片方法，由羧基化微球、偶联于微球上的蛋白检测指标及其对应的单抗指标等组成。其特征在于，所述微球表面的蛋白检测指标包括：黄曲霉毒素总量、呕吐毒素、T‑2毒素、玉米赤霉烯酮四种真菌毒素的完全抗原，均通过EDC法共价偶联于羧基化的微球表面。