[发明专利]猪巨细胞病毒抗体间接阻断ELISA检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种猪巨细胞病毒抗体间接阻断ELISA检测试剂盒。试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阻断抗体，样品稀释液，洗涤液，显色液A，显色液B，终止液。该试剂盒的检测板为猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区蛋白重组抗原包被的可拆卸96孔酶标板，酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔抗体，阻断抗体为兔抗猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区蛋白多克隆抗体。本发明有益的积极效果是：特异性强、灵敏度高、操作简单，适合于临床大规模推广应用，具有广阔的市场前景。

主权项

一种猪巨细胞病毒抗体间接阻断ELISA检测试剂盒，其特征在于：包括抗体检测板，酶结合物工作液，样品稀释液，显色液A，显色液B，终止液；阻断抗体，洗涤液；所述的阻断抗体为使用纯化后的猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区蛋白免疫家兔后，从家兔体内获得的多克隆抗体；所述酶结合物工作液为：商品化的辣根过氧化物标记的山羊抗兔抗体，进行1∶10000稀释的稀释液，酶标二抗直接加入酶标二抗稀释液中，酶标二抗稀释液为：KH2PO40.2g，Na2HPO4·12H2O 2.9g，NaCl 29g，KCl 0.2g，PEG6000 40g，加ddH2O定容至1000ml，加入0.01％～0.05％硫柳汞，调pH至7.4；所述样品稀释液为：KH2PO4 0.2g，Na2HPO4·12H2O 2.9g，NaCl 29g，KCl 0.2g，PEG600040g，加ddH2O定容至1000ml，加入0.01％～0.05％叠氮钠，调pH至7.4；所述显色液A为：0.2mol/L Na2HPO4 51.4ml，0.1mol/L柠檬酸48.6ml，用HCl调pH值至5.0～5.4，加30％H2O2 67μl；所述显色液B为：TMB 50mg，加无水乙醇5ml，搅拌溶解后加0.1mol/L柠檬酸5ml，0.1mol/L EDTA 0.5ml，加ddH2O定容至100ml；所述终止液为2mol/L H2SO4溶液；所述抗体检测板为猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区蛋白重组抗原包被的可拆卸96孔酶标反应板，酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔抗体，阻断抗体为兔抗猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区蛋白多克隆抗体。